[發明專利]一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品、組合物、試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201810547644.0
• 申請日: 2018-05-31
• 公開（公告）號: CN108486232A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 承康平;段小紅;楊春燕;丁蕊;王東亮;周啟明
• 申請（專利權）人: 南京求臻基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 舒暢

1.一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品，其包括引物和鎖核酸探針；

所述引物包括序列如SEQ ID NO：1所示的正向引物和序列如SEQ ID NO：2所示的反向引物；

所述鎖核酸探針序列如SEQ ID NO：3所示，其5'端第4、6、7、8和10位核苷酸為鎖核酸。

2.根據權利要求1所述的一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品，其特征在于，所述探針的5'端標記熒光發射基團，3'端標記淬滅基團。

3.根據權利要求2所述的一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品，其特征在于，所述熒光發射基團選自FAM、HEX、VIC或JOE中的任一種，優選為FAM。

4.根據權利要求2所述的一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品，其特征在于，所述淬滅基團選自所IABkFQ、TAMRA、BHQ或MGB中的任一種，優選為IABkFQ。

5.根據權利要求1～4任一項所述的一種檢測人類EGFR基因T790M突變的組合產品，其特征在于，所述組合產品還包括肽核酸阻斷核酸，其序列如SEQ ID NO：4所示。

6.含有權利要求1～5任一項所述組合產品的組合物；

優選地，所述正向引物的濃度為0.8-1.2μM，反向引物的濃度為0.8-1.2μM；

優選地，所述鎖核酸探針的濃度為0.2-0.3μM。

7.根據從屬權利要求5的權利要求6所述的組合物，其特征在于，所述肽核酸阻斷核酸的濃度為4.5-5.5μM。

8.一種檢測人類EGFR基因T790M突變的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1～5任一項所述的組合產品。

9.根據權利要求8所述的一種檢測人類EGFR基因T790M突變的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括數字PCR反應緩沖液、樣品處理液、無核酸水、DNA聚合酶、EGFR基因T790M突變型對照序列以及野生型對照序列的一種或多種。

10.權利要求1～5任一項所述的組合產品或權利要求6或7所述的組合物或權利要求8或9所述的試劑盒在制備腫瘤患者用藥敏感性檢測劑中的應用。