[發明專利]間皮素檢測細胞質控片

在審

• 申請號: 201810545950.0
• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN110531083A
• 公開（公告）日: 2019-12-03
• 發明（設計）人: 于占嬌;毛海燕;王慶波;李壯林;李元浩
• 申請（專利權）人: 榮昌生物制藥(煙臺)有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N1/36;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種間皮素免疫組化檢測細胞質控片以及相關檢測試劑，所述細胞質控片包括切片區；所述切片區粘附有石蠟切片，所述石蠟切片含有4種起對照作用的表達間皮素的陰性、弱陽性、陽性、強陽性細胞團；本發明涉及的免疫組化檢測細胞質控片主要用于提高免疫組化檢測結果的準確性和一致性，有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種間皮素免疫組化檢測相關細胞或組織樣品對照質控片以及相關檢測試劑。

背景技術

間皮素(Mesothelin，MSLN)是一個膜蛋白，間皮素基因編碼的是一個71KD的前蛋白，經修飾切割變成兩段，40KD的糖基化磷脂酰肌醇細胞膜錨定蛋白和31KD的游離片段稱為巨核細胞促進因子。有研究證實 40KD的膜錨定蛋白包含一段與另一個腫瘤標志物CA125蛋白的結合區，它們可能與細胞粘附有關，因而猜測可能會有助于原發癌發生遠端轉移(例如腹腔轉移)，并導致預后較差。

雖然Mesothelin的功能尚不確切，但是無論是細胞膜結合區還是游離區都被證實可以作為間皮癌、胰腺癌、卵巢癌等多種腫瘤的標志物和治療靶點。據報道胰腺癌(86％-100％)和卵巢非黏液性癌，其中漿液性癌 (93％-100％)、透明細胞癌(43％-75％)和移行細胞癌(100％)中存在MSLN陽性表達。大約40％到50％的肺腺癌和15％到30％的肺鱗狀細胞癌也有報道存在MSLN陽性表達。準確的鑒別出患有大量表達 MSLN蛋白腫瘤的患者(即可能從MSLN靶向治療中受益的患者)，對于指導患者的用藥是有意義的。

免疫組化方法的主要原理是：應用免疫學基本原理—抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及相對定量的研究方式。

免疫組化技術的主要特點是：1特異性強：免疫學的基本原理決定了抗原與抗體之間的結合具有高度特異性；2敏感性高：抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合，這樣高敏感性的抗體抗原反應，使免疫組化方法越來越方便地應用于常規病理分析工作。3定位準確：該技術通過抗原抗體反應及呈色反應，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位，因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態與功能相結合的研究，對病理學研究的深入具有重要的意義。

由于免疫組化實驗過程相對復雜，影響檢測結果的因素較多，并且免疫組化結果的判讀受判讀者主觀影響相對較大，因此，一般而言，需要標準化的對照裝置，例如：細胞質控片。現有技術中的用于免疫組化實驗的質控片并沒有設置不同表達強度的對照細胞，因此，對照效果有待提高。

在實驗過程中使用細胞質控片作用如下：

在免疫組化過程中對于細胞質控片染色是否正常可以作為免疫組化檢測系統正常的依據，如果實驗過程出現意外可以輔助尋找問題。

質控片可以用于抗體篩選，實驗條件篩選等過程，節省購買醫院病理切片的成本，相比病理組織，使用細胞質控片具有較高的一致性。

病理組織進行免疫組化檢測后，組織會出現不同強度的染色，組織中腫瘤細胞染色強度的高低與染色所占的的百分比通常能夠反映腫瘤組織中靶標抗原的表達量。細胞質控片中存在MSLN不同表達強度的細胞，免疫組化染色后能夠顯示不同的染色強度，在病理組織切片免疫組化結果判讀時，細胞質控片可以作為染色強度的“比色卡”作用，輔助病理切片免疫組化結果的判讀。提高對免疫組化實驗結果判讀的精密度，從而提高該靶標免疫組化檢測結果的準確性。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于免疫組化法檢測腫瘤靶標MSLN蛋白表達情況的質控切片，該質控切片的作用是能夠提高MSLN靶標蛋白免疫組化檢測結果的可信度和準確性。