[發(fā)明專利]一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組、其LAMP檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810544839.X
• 申請(qǐng)日: 2018-05-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108570511A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李杉;王健松;楊佳寧;張瑞玲;張雷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué);廣州白云山醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司白云山制藥總廠
• 主分類號(hào): C12Q1/689
• 分類號(hào): C12Q1/689;C12Q1/14;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/445
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 齊云

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，提供一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組，其包括有外引物對(duì)和內(nèi)引物對(duì)，其針對(duì)金黃色葡萄球菌上的特定區(qū)域，利用LAMP技術(shù)能夠擴(kuò)增金黃色葡萄球菌上的靶基因，實(shí)現(xiàn)金黃色葡萄球菌的快速檢測(cè)，同時(shí)，提升金黃色葡萄球菌檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率。此外，本發(fā)明還提供一種包括該LAMP檢測(cè)引物組的金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)試劑盒以及其檢測(cè)方法，其能夠?qū)崿F(xiàn)金黃色葡萄球菌的快速檢測(cè)，具有靈敏度高，特異性好的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組、其LAMP檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)屬于微球菌科葡萄球菌屬，是一種革蘭氏陽(yáng)性球菌，廣泛分布于自然界，如空氣、水、人和動(dòng)物的排泄物中，是人類化膿性感染和細(xì)菌性中毒中最常見(jiàn)的病原體之一，可引起局部化膿性感染，也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至引起敗血癥、膿毒癥等全身感染。近年來(lái)，美國(guó)疾病控制中心報(bào)告，由金黃色葡萄球菌引起的感染占全球感染的第二位，所以金黃色葡萄球菌所引起的疾病已成為全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題，嚴(yán)重危害人類安全和健康。而對(duì)于金黃色葡萄球菌的感染的快速檢驗(yàn)，是指導(dǎo)臨床感染治療用藥的關(guān)鍵。

目前對(duì)于金黃色葡萄球菌包括耐藥菌的檢測(cè)方法主要是微生物培養(yǎng)及生化鑒定、免疫檢測(cè)和各種PCR檢測(cè)等。微生物培養(yǎng)及生化鑒定培養(yǎng)方法是檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌的經(jīng)典方法，存在需要專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，操作繁瑣，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)等缺點(diǎn)。目前，多采用PCR技術(shù)測(cè)到金黃色葡萄球菌，但因技術(shù)對(duì)模板的數(shù)量和質(zhì)量都有較高的要求，需要熱循環(huán)及凝膠電泳等設(shè)備，價(jià)格相對(duì)昂貴，很難做到現(xiàn)場(chǎng)快速測(cè)定。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組，其利用金黃色葡萄球菌的特定區(qū)域，進(jìn)行LAMP，能夠快速、簡(jiǎn)便且精準(zhǔn)地實(shí)現(xiàn)金黃色葡萄球菌的擴(kuò)增。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)試劑盒，其利用上述LAMP檢測(cè)引物組進(jìn)行LAMP，能夠有效縮短檢測(cè)時(shí)間，提高金黃色葡萄球菌檢測(cè)的準(zhǔn)確率。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種金黃色葡萄球菌的檢測(cè)方法，其利用上述金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組或其LAMP檢測(cè)試劑盒進(jìn)行金黃色葡萄球菌的快速檢測(cè)，其具有靈敏度高，特異性好的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組，其包括有外引物對(duì)和內(nèi)引物對(duì)，外引物對(duì)包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物，內(nèi)引物對(duì)包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物。

根據(jù)上述的LAMP檢測(cè)引物組在擴(kuò)增或檢測(cè)金黃色葡萄球菌中的應(yīng)用。

一種金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)試劑盒，其包括有如上述金黃色葡萄球菌的LAMP檢測(cè)引物組。

一種金黃色葡萄球菌的檢測(cè)方法，其包括以下步驟：利用外引物對(duì)、內(nèi)引物對(duì)和/或環(huán)引物對(duì)在LAMP反應(yīng)體系下，擴(kuò)增目的基因；

外引物對(duì)包括序列如SEQ ID No.1所示的上游引物以及序列SEQ ID No.2所示的下游引物，內(nèi)引物對(duì)包括序列如SEQ ID No.3的上游引物以及序列如SEQ ID No.4所示的下游引物；環(huán)引物對(duì)包括序列如SEQ ID No.5所示的上游引物以及序列如SEQ ID No.6所示的下游引物。

本發(fā)明具有以下有益效果：