[發明專利]一種快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP引物組及其應用

在審

• 申請號: 201810543501.2
• 申請日: 2018-05-31
• 公開（公告）號: CN108660192A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發明（設計）人: 李軍;吳翠蘭;彭昊;潘艷;馮世文;陶立;李常挺;鐘舒紅;馬春霞;謝永平;胡帥;賀會利
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/689;C12Q1/06;C12N15/11
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 李彥孚;何承鑫

1.一種快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP引物組，其特征在于，所述LAMP引物組由具有SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的內引物FIP和BIP、具有SEQ ID NO:3和SEQID NO:4所示核苷酸序列的外引物F3和B3、具有SEQ ID NO:5所示核苷酸序列的環引物LB組成。

2.根據權利要求1所述快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP引物組，其特征在于，所述LAMP引物組是依據溶血性曼氏桿菌gcp基因進行設計。

3.根據權利要求1或2所述快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP引物組，其特征在于，所述LAMP引物組在制備檢測溶血性曼氏桿菌試劑盒的應用。

4.一種快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP試劑盒，其特征在于，所述LAMP試劑盒包括如權利要求1所述的SEQ ID 1~5所示的核苷酸序列。

5.根據權利要求4所述的快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP試劑盒，其特征在于，所述LAMP試劑盒還包括以下組分：

（1）2×反應緩沖液：包含Buffer、dNTPs、Mg²⁺

（2）Bst DNA聚合酶

（3）超純水

（4）陽性對照：溶血性曼氏桿菌DNA。

6.根據權利要求4所述的快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP試劑盒，其特征在于，所述的引物組使用濃度為25 pmol/μL。

7.根據權利要求4或5所述的快速檢測溶血性曼氏桿菌的LAMP試劑盒，其特征在于，所述LAMP試劑盒的反應程序為63℃恒溫保持60 min，擴增結束后85℃滅活5 min，反應在20-25 min出現擴增。