[發明專利]一種提高早梨莖尖包埋玻璃化法超低溫保存效果的方法在審
| 申請號: | 201810543438.2 | 申請日: | 2018-05-21 |
| 公開(公告)號: | CN108812308A | 公開(公告)日: | 2018-11-16 |
| 發明(設計)人: | 尹明華;洪森榮;吳夏俊鵬 | 申請(專利權)人: | 上饒師范學院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 334001 江西省上饒市信州*** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 莖尖 超低溫保存 玻璃化法 包埋 成活率 碳納米管 培養基 量子點 石墨烯 再生 | ||
1.提高早梨莖尖包埋玻璃化法超低溫保存效果的方法,其特征在于有以下步驟:(1)在超凈工作臺內,切取早梨莖尖并將其接種于液體培養基一:MS+0.3-0.5g/L碳納米管+3%(w/v)海藻酸鈉+0.3M蔗糖;(2)吸取莖尖轉移到液體培養基二:0.4M蔗糖+0.3-0.5g/L石墨烯量子點+0.1M CaCl2,進行常規包埋;(3)將包埋珠轉移到液體培養基三:MS+0.3-0.5g/L碳納米管+0.5M蔗糖,進行常規預培養;(4)將包埋珠轉移到液體培養基四:PVS2+0.3-0.5g/L石墨烯量子點+0.4M蔗糖,進行常規脫水;(5)將包埋珠轉移到凍存管的液體培養基五:PVS2+0.3-0.5g/L碳納米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子點,進行常規液氮保存;(6)液氮保存后,包埋珠經過常規化凍后轉移到液體培養基六:MS+0.3-0.5g/L碳納米管+1.2M蔗糖,進行常規洗滌;(7)將包埋珠轉移到固體再生培養基七:MS+1-2mg/L噻苯隆+0.1-0.3mg/L NAA+0.3-0.5g/L碳納米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子點+30g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂,接種后將材料放入培養室進行常規條件培養,可顯著提高莖尖的凍后成活率。
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