[發明專利]抗Napsin A蛋白的單克隆抗體及其細胞株、制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810541424.7
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108467433B
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 胡濱陽;楊清海;陳惠玲;趙普;王小亞
• 申請（專利權）人: 福州邁新生物技術開發有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;C12N5/20;G01N33/573;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 福州市景弘專利代理事務所(普通合伙) 35219
• 代理人: 林祥翔;黃以琳

本發明涉及一種新的胃蛋白酶樣天門冬氨酸蛋白酶(Napsin A)的單克隆抗體，及其雜交瘤細胞株21A5的制備方法，該單克隆抗體在腫瘤發生及預后評價的用途。制備該抗體的抗原為一段優選的抗原肽，經化學合成后與KLH載體蛋白偶聯為免疫原后免疫小鼠，最終獲得的抗體屬于IgG2b亞型，編碼其可變區的序列經基因克隆的方式獲得。最終獲得的抗體對多種腫瘤組織的免疫組織化學檢測發現，該抗體可以很好的鑒別腫瘤的發生，可以用于這些腫瘤的免疫學診斷。

技術領域

本發明涉及生物醫學工程領域，特別涉及一種抗Napsin A蛋白單克隆抗體及其細胞株、制備方法和應用。

背景技術

原發性肺癌(以下簡稱肺癌)是我國最常見的惡性腫瘤之一。中國腫瘤統計報告(Chen W,Zheng R,Baade PD,Zhang S,Zeng H,Bray F,Jemal A,Yu XQ,He J.Cancerstatistics in China,2015.CA Cancer J Clin.2016,66(2):115-32)指出，肺癌是發病率最高的癌癥，其死亡率也位居前列。2015年新發肺癌病例為73.33萬(男性50.93，女性22.40萬)，同期，我國肺癌死亡人數為61.02萬(男性43.24萬，女性17.78萬)，占惡性腫瘤死因的21.68％。

在高危人群中開展肺癌篩查有益于早期發現早期肺癌，提高治愈率。低劑量CT(low-dose computed tomography，LDCT)發現早期肺癌的敏感度是常規胸片的4-10倍，可以早期檢出早期周圍型肺癌。肺癌篩查還可結合免疫組化等技術開展，包含的信息應滿足臨床分期的需要，并給出pTNM分期。

2015版的WHO在肺癌分類方法中融入了更多的遺傳信息，更加重視免疫組化和分子診斷對肺癌分類的重要性，然而沒有任何一種分類可以囊括肺癌的所有特性，病理分類的重要性在于指導治療和預后。William D.Travis根據細胞起源提出把類癌、小細胞肺癌和大細胞神經內分泌統歸入神經內分泌腫瘤，這個分類存在巨大爭議。腺癌與鱗狀細胞癌鑒別的免疫組化標記物宜選用TTF-1、NapsinA、p63、P40和CK5/6；神經內分泌腫瘤標記物宜選用CD56、Syn、CgA、Ki-67和TTF-1，在第2015版分類方法中還指出，在浸潤性黏液型腺癌的診斷中，不表達TTF-1和NapsinA，膠樣腺癌中弱表達或病灶表達TTF-1和NapsinA，肺大細胞癌的先決條件是表達TTF-1和NapsinA和鱗癌標志物及黏液染色均為陰性，診斷時需注重與腺癌實體亞型(TTF-1、NapsinA、黏液染色陽性；P40、P63(4Aa)、CK5/6陰性)、非角化性鱗癌(TTF-1、NapsinA、黏液染色陰性；P40、P63(4Aa)、CK5/6陽性)和腺鱗癌(不同區域有腺癌和鱗癌，且每一種成分要＞10％)鑒別。因為Napsin A蛋白表達情況和腫瘤發生、發展的密切關系，因此，獲得針對Napsin A的優質抗體一直受到重視。