[發(fā)明專利]一種羊肚菌菌種分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810540704.6
• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108812079B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李勇;史新敏;樊繼德;李剛波;趙林;張婷
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇徐淮地區(qū)徐州農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所(江蘇徐州甘薯研究中心)
• 主分類號: A01G18/40
• 分類號: A01G18/40;A01G18/20
• 代理公司: 徐州市三聯(lián)專利事務(wù)所 32220
• 代理人: 周愛芳

本發(fā)明公開了一種羊肚菌菌種分離方法，屬羊肚菌分離方法領(lǐng)域。利用這種方法，用特定規(guī)格透明長方體玻璃瓶作母種容器，按特定配方制得培養(yǎng)基。把基部帶土的羊肚菌種菇削至見斑狀菌肉，挑取0.3毫米見方菌土混合體，直接接菌到容器內(nèi)培養(yǎng)基平面的后部。在特定溫度下，經(jīng)1?2次提純，即可得到羊肚菌純菌絲體。與現(xiàn)有羊肚菌菌種分離方法相比，這種分離方法操作簡單，成功率高，解決了羊肚菌生產(chǎn)中菌種分離成功率過低的技術(shù)瓶頸問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及羊肚菌菌種分離方法領(lǐng)域，涉及一種羊肚菌的菌種分離方法。

背景技術(shù)

羊肚菌（Morchella deliciosa Fr.）是一種珍稀食藥用菌，因子實體花紋酷似羊肚得名，是世界四大名菌之一。其味道鮮美、營養(yǎng)豐富、醫(yī)用價值高，含有18種氨基酸，其中8種氨基酸是人體不能制造的，有 “蘑菇皇后”之稱，具有珍貴的食用價值和突出的經(jīng)濟價值，目前市場價高達2000元/公斤以上。

羊肚菌傳統(tǒng)上主要靠采集野生品種，近幾年，人工栽培面積不斷擴張，但栽培技術(shù)尚不完善，特別是菌種分離技術(shù)，成功率不足10%?，F(xiàn)有羊肚菌菌種分離技術(shù)存在的主要不足和缺陷，一是母種培養(yǎng)面面積太小，加大了菌絲提純難度；二是種菇分離部位選取不當。現(xiàn)有技術(shù)是用菌柄或菌帽做分離材料，這一部位活性差，分離成功率很低；三是培養(yǎng)溫度偏高，使羊肚菌菌絲相對于雜菌菌絲失去生長優(yōu)勢，無法有效提純。羊肚菌菌種分離上的這一技術(shù)短板加大了羊肚菌種植風險和種植成本，使菌種分離技術(shù)成為產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一大瓶頸。

發(fā)明內(nèi)容

菌種分離技術(shù)是羊肚菌栽培的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，為了保護我國珍貴的野生羊肚菌資源，保護生態(tài)環(huán)境，推動羊肚菌產(chǎn)業(yè)的商業(yè)化種植，降低種植風險和種植成本，本發(fā)明提供了一種安全、高效、成功率可達90%以上的羊肚菌菌種分離方法。

本發(fā)明是以如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：一種羊肚菌菌種分離方法的具體步驟為：一種羊肚菌菌種分離方法，具體分離步驟如下：

步驟1） 選擇母種容器：用長15厘米，寬6厘米，高4厘米，且瓶口為直徑2.5厘米的高透明長方體玻璃瓶作母種容器；該母種容器設(shè)計與試管容器相比，有五大優(yōu)勢：一是方便對瓶內(nèi)菌絲體觀察、判斷和記錄；二是使菌絲體伸展有足夠的空間；三是便于菌絲體的提純復(fù)壯；四是培養(yǎng)基厚度一致，便于擴繁時發(fā)菌速度的一致性；五是菌絲體有效面積大，省工省時，有利于規(guī)模化生產(chǎn)。

步驟2） 備制母種培養(yǎng)基：各原料及其用量為：純凈水1100毫升，新鮮去皮土豆200克，小麥50克，瓊脂20克，葡萄糖18克，磷酸二氫鉀0.2克，硫酸鎂0.1克，維生素B1為3毫克；

母種培養(yǎng)基的制備方法為：在不銹鋼鍋里加水1100毫升，把新鮮去皮土豆200克切成0.5厘米薄片，和50克小麥一起加入水中，小火煮沸15分鐘后過濾，取濾汁1000毫升，加入20克瓊脂，小火煮至完全融化，然后加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和維生素B1，得到母種培養(yǎng)基，即可裝入母種容器，每瓶母種容器裝母種培養(yǎng)基20毫升，用棉塞或透氣膠塞封口，放入滅菌鍋，在120°C保持15分鐘后取出，平放進超凈工作臺或其它無菌處，凝固待用。

步驟3）挑選種菇：種菇的主要標準，一是要在頭潮菇中選擇；二是種菇的商品性和農(nóng)藝性狀要突出；三是子實體健壯、無畸形、無病蟲害；四是選擇6-8成熟的子實體；另外，種菇要帶基質(zhì)土一起拔出，在采摘后2小時內(nèi)進行分離培養(yǎng)。

步驟4）母種分離方法：首先用刀片把種菇基部的土壤削至見60-70%菌肉，在無菌條件下，挑取種菇基部的菌肉和基質(zhì)土混合物0.3立方厘米的方塊，過酒精燈火焰后接入備好的母種培養(yǎng)基平面，靠底部放置，封口后培養(yǎng)。