[發(fā)明專利]一株植物內生放線菌及其應用

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• 申請日: 2018-05-30
• 公開（公告）號: CN108728378A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發(fā)明（設計）人: 田永強;李曉廣;王志寬
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/24;C12N9/26;C12N9/42;C12N9/52;C12R1/01
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本發(fā)明公開了一株植物內生放線菌Actinocorallia sp.A251，分離于響葉楊根組織。采用多相分類鑒定手段確定該菌株為珊瑚放線菌屬的一個新物種。本發(fā)明的珊瑚放線菌具有氧化酶、蛋白酶、過氧化氫酶、還原酶、類脂酯酶(C₄)等酶活性，可被廣泛應用于各類生物工程酶制劑的相關生產領域。而且，該菌株能在發(fā)酵培養(yǎng)基中產生具有抗腫瘤、抗糖尿病、抗菌的活性化合物，如細菌素、聚酮化合物等，表明該菌在抗感染、抗真菌、抑菌等相關領域具有廣泛開發(fā)應用前景。

技術領域

本發(fā)明涉及微生物菌種及其應用領域，具體地說，本發(fā)明涉及一株從響葉楊根組織內部篩選得到的稀有珊瑚放線菌及其應用研究的技術領域。

背景技術

放線菌（Actinomycetes）廣泛存在于不同的自然生態(tài)環(huán)境中，大部分放線菌都能產生抗生素、氨基酸、維生素、有機酸、酶及酶抑制劑等生物活性化合物，具有廣泛的實際用途和巨大的經濟效益。迄今為止，人們從放線菌中發(fā)現了近萬種抗生素，其中60%以上的抗生素都是由放線菌產生的。但隨著越來越多的人類致病菌對抗生素耐藥性的出現，尋找安全、高效、低毒天然的新型生物活性化合物勢在必行。然而，長期以來對土壤放線菌的開發(fā)，從中發(fā)現新結構化合物的可能性大大降低。因此，尋找新來源是提高開發(fā)效率的關鍵。

植物內生菌（endophyte）是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物各種組織和器官內部或細胞間隙的真菌或細菌。它是植物微生態(tài)系統中的組成部分,在不同健康植物的根、莖、葉及果實中均生活著微生物的正常菌群。它們的代謝活動及產物可促進宿主植物適應外界各種（生物、非生物）環(huán)境壓力, 維持生態(tài)系平衡。迄今的研究表明, 植物內生菌可與植物結瘤固氮, 產生生長素促進宿主生長, 產生抗生素增加植物的抗病性, 產生次生代謝活性物質使植物具有抗逆、抗蟲、除草功能。從而, 植物內生菌的諸多功能性狀成為人們實際利用的新的生物資源, 近年來成為微生物資源研究的熱點之一。

近年來，從植物組織中發(fā)現了一些新的內生放線菌（endophytic actinomycete），產生新的生物活性代謝物或產生具有新特性的酶；對植物內生放線菌與植物宿主及其他微生物之間的關系研究有新的發(fā)現，其在植物病害防治中的作用已引起重視。從藥物開發(fā)的角度看，新的放線菌菌株往往具有基因新穎性，預示著其可能存在的新活性，隨著大量內生放線菌新種的不斷發(fā)現，從中尋找新型生物活性化合物逐漸顯現出巨大潛力，近年來已從內生放線菌中分離到多種新活性或者新結構的化合物。

到目前為止，珊瑚放線菌（Acinocorallia）屬共計發(fā)現了8株有效菌株，研究該屬內的其它菌株具有潛在的經濟價值和完善微生物資源庫的目的。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供一株從響葉楊根組織分離得到的新的珊瑚放線菌，該菌具有還原酶、氧化酶、過氧化氫酶、抗菌、抗腫瘤、抗糖尿病以及酯酶(C₄)等酶活活性，同時與珊瑚放線菌屬中已有效發(fā)表菌種的16S rRNA基因序列相似度最高，且最高相似度為98.0 %，這可明顯區(qū)別于已公開報道的其它有效菌種。

本發(fā)明提供一株稀有的植物內生放線菌Actinocorallia sp. A251。

本發(fā)明以含有放線菌酮（50 mg/L）和萘啶酮酸（25 mg/L）的培養(yǎng)基為篩選條件，先對響葉楊的根組織進行表面清洗、消毒、滅菌處理，再將根組織切片置于培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)、分離及純化，經多級篩選獲得一株稀有的放線菌，即珊瑚放線菌Actionocorallia sp.A251。