[發(fā)明專利]一種利用響應(yīng)面法結(jié)合遺傳算法和直接搜索算法優(yōu)化的北沙參糖類化合物的提取方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810534028.1
• 申請(qǐng)日: 2018-05-29
• 公開（公告）號(hào): CN108732117A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔寧;蘇本正;于宗淵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省中醫(yī)藥研究院
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G06N3/12;C08B37/00
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 李桂存

本發(fā)明屬于化合物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用響應(yīng)面法結(jié)合遺傳算法和直接搜索算法優(yōu)化的北沙參糖類化合物的提取方法。該方法通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)：（1）供試品溶液的制備；（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作；（3）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析：①單因素試驗(yàn)②BBD?響應(yīng)面法優(yōu)化分析；（4）遺傳算法搜索分析；（5）直接搜索法搜索分析。本發(fā)明先采用BBD?響應(yīng)面優(yōu)化法建立數(shù)學(xué)模型、獲得目標(biāo)函數(shù)后，使用遺傳算法及直接搜索算法搜索各因素的精確最優(yōu)值，將三種方法聯(lián)合使用，以得到最佳優(yōu)化結(jié)果，克服了現(xiàn)有的三種方法所存在的局限性。通過(guò)本發(fā)明優(yōu)化的提取方法，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)北沙參糖類化合物進(jìn)行最大程度的提取，具有重要的研究意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化合物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用響應(yīng)面法結(jié)合遺傳算法和直接搜索算法優(yōu)化的北沙參糖類化合物的提取方法。

背景技術(shù)

北沙參(Radix Glehniae)是傘形科植物珊瑚菜Glehnia littoralisFr. schmidtex Miq的干燥根。該品性甘，味微苦、微寒，有養(yǎng)陰清肺、益胃生津的作用，對(duì)于治療肺熱燥咳、熱病津傷、嘮嗽痰血、口渴等病癥，是我省道地藥材之一。北沙參的主要化學(xué)成分為糖類、香豆素類、磷脂、生物堿、氨基酸、揮發(fā)油、微量元素等。其中，糖類成分含量最高。另外，有研究表明北沙參糖類化合物可增強(qiáng)體液免疫和細(xì)胞免疫功能，具有免疫活性。因此，北沙參的主要成分（含量高）和重要免疫活性成分——糖類化合物具有重要的研究?jī)r(jià)值，對(duì)北沙參糖類化合物進(jìn)行提取條件的優(yōu)化研究成為必要。

文獻(xiàn)《星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化熱水浸提北沙參多糖的工藝研究》及《響應(yīng)面法優(yōu)化北沙參中糖類的提取工藝研究》提供了一種采用響應(yīng)面法進(jìn)行糖類化合物提取的工藝優(yōu)化方法，但是，兩種都方法都僅單純的采用響應(yīng)面法進(jìn)行工藝優(yōu)化，方法中各因素的波動(dòng)對(duì)效應(yīng)值的影響不明確，實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，為了達(dá)到較高的效應(yīng)值，需要對(duì)各因素進(jìn)行精確的控制，增加了工藝控制的難度，目前存在的方法中，針對(duì)此類問(wèn)題，還沒(méi)有更好的解決方法。研究一種提取工藝更加優(yōu)化的方法對(duì)于藥材北沙參糖類化合物的提取具有重要的價(jià)值和意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種利用響應(yīng)面法結(jié)合遺傳算法和直接搜索算法優(yōu)化的北沙參糖類化合物的提取方法。

本發(fā)明為了實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案為：

本發(fā)明提供了一種利用響應(yīng)面法結(jié)合遺傳算法和直接搜索算法優(yōu)化的北沙參糖類化合物的提取方法，包括以下步驟：

（1）供試品溶液的制備：稱取50-200目北沙參粉末5g，以水料比10-60mL/g熱水回流提取1-3次，提取時(shí)間為1-6h，提取液濾、合并后，離心，吸取上清液定容至500mL容量瓶，從中精密量取4mL定容至250mL容量瓶；充分混勻后從中精密吸取1mL入干燥潔凈的具塞試管中，平行3支試管，繼續(xù)進(jìn)行蒽酮-硫酸反應(yīng)，然后在590nm下測(cè)定供試品溶液的吸光度，每個(gè)樣品測(cè)定兩次，以吸光度的平均值計(jì)算提取率結(jié)果；

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：稱取105℃干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖0.5g，用純凈水稀釋并定容至100mL容量瓶，從中吸取1mL再用純凈水定容至50mL容量瓶，得到濃度為0.1mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，每組平行3支試管，每支試管分別補(bǔ)加純凈水至液體總體積為1.2mL，同時(shí)取1.2mL純凈水作空白對(duì)照，分別加入4mL蒽酮試劑，迅速浸入冰水浴中冷卻，充分振搖后，各試管同時(shí)浸入沸水浴中，管口加蓋開始反應(yīng)，反應(yīng)10分鐘，振搖均勻、冷卻、室溫放置10分鐘后，獲得標(biāo)準(zhǔn)樣品，并在590nm檢測(cè)波長(zhǎng)下，測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度;每個(gè)樣品測(cè)定兩次，以吸光度的平均值為縱坐標(biāo)，以葡萄糖的濃度C（mg/mL）為橫坐標(biāo)，得葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程；