[發明專利]一種土霉素季銨鹽的制備方法

有效

• 申請號: 201810526115.2
• 申請日: 2018-05-29
• 公開（公告）號: CN108841910B
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發明（設計）人: 陳文輝;萬義斌;葛友群;左飛鴻;楊明;李進進;萬建輝;李杰
• 申請（專利權）人: 江西國藥有限責任公司
• 主分類號: C12P29/00
• 分類號: C12P29/00;C12N1/20;C07C231/24;C07C237/26;C12R1/59
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 宋會英

1.一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：包括以下步驟：

（1）孢子制備：

將龜裂鏈霉菌經無菌手續接入麩皮、瓊脂和水組成的斜面培養基中，在36.0-36.4℃的溫度、56-60％的相對濕度條件下培養4-5天后，挑選菌落正常無污染的孢子作為種子；

（2）種子制備：

將步驟（1）挑選得到的孢子接入一級種子罐，在32-34℃下培養至培養液為黃色，且培養液的pH值達到6.0-6.4后，將培養液移至二級種子罐，繼續在32-34℃下擴大培養38-42h；

（3）發酵：

將步驟（2）得到的培養液在32-33℃下發酵110-140h，通氧量為0.9-1.1v/m，當培養液的pH＜6.4時，開始通入液氨，直至pH在6.4-6.8之間；

（4）酸化和純化：

用0.01mol/L的鹽酸與0.1mol/L的草酸將步驟（3）所得發酵液調節至pH為1.70-1.74，隨后向發酵液中加入純化劑，攪拌后過濾，得到濾液；

（5）脫色：

將濾液用復合脫色劑進行脫色處理20-40分鐘，過濾；

（6）干燥：

將脫色后的濾液進行干燥，得到土霉素干品，控制水分為4%-7%；

（7）溶解結晶：

將蒸餾水攪拌并升溫至55-60℃，加入鹽酸調節pH值為6.0-6.5，繼續升溫至62-68℃，投入步驟（6）制得的土霉素干品，攪拌至土霉素全部溶解，再加入備好的DTAC，繼續攪拌，繼續加入稱量好的氫氧化鈣，料液pH值控制在9.0-10.0之間，結晶，靜置，離心分離；

（8）干燥：

將步驟（7）得到的濕成品裝入雙錐干燥器內，控制烘干溫度90±5℃，真空度≤-0.07MPa，進行干燥，粉碎過篩，稱重，分裝即得土霉素季銨鹽；

在所述的步驟（3）中，在發酵的同時加入由煙酸和D-氨基葡萄糖鹽酸鹽組成的復合活性試劑，煙酸和D-氨基葡萄糖鹽酸鹽的重量比為：3.5-4.5:1；

在所述的步驟（4）中，純化劑為硫酸鋅、高鐵酸鉀、十二烷基糖苷組成的復合試劑，硫酸鋅、高鐵酸鉀、烷基糖苷的重量比為：2.5-3.0:5.3-5.7:1。

2.如權利要求1所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：在所述的步驟（1）中，斜面培養基的各組分的質量份數為：麩皮5-15份、瓊脂5-10份、水80-100份。

3.如權利要求1所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：復合活性試劑的添加量為培養液重量的0.2-0.6%。

4.如權利要求1所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：純化劑的添加量為發酵液重量的0.15-0.25%。

5.如權利要求1所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：在所述的步驟（5）中，復合脫色劑各組分的質量份數為：活性炭25-35份、ADS-7大孔吸附樹脂10-20份、D1400大孔吸附樹脂10-20份、NKA-9型大孔吸附樹脂8-12份。

6.如權利要求5所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：復合脫色劑的添加量為濾液重量的1.0-2.0%。

7.如權利要求1所述的一種土霉素季銨鹽的制備方法，其特征為：在所述的步驟（7）中，蒸餾水、土霉素干品、DTAC、氫氧化鈣的重量比為：3.5-4.5:1:0.30-0.35:0.16-0.20。