[發明專利]檢測circRNF13和LOC284454試劑的應用及試劑盒

有效

• 申請號: 201810525205.X
• 申請日: 2018-05-28
• 公開（公告）號: CN108796075B
• 公開（公告）日: 2020-10-02
• 發明（設計）人: 熊煒;曾朝陽;郭燦;李桂源;李小玲;王金鵬;熊芳;莫勇真;唐艷艷;范春梅;劉凌云;趙瑾
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所(普通合伙) 43114
• 代理人: 袁靖

本發明公開了檢測環狀RNA circRNF13和長鏈非編碼RNA LOC284454試劑的應用及試劑盒。特別是檢測環狀RNA circRNF13和長鏈非編碼RNALOC284454的實時熒光定量分析法輔助診斷腫瘤的制劑。通過研究證實circRNF13和LOC284454在鼻咽癌、口腔癌、甲狀腺癌患者血清中均表達上調。因此，將circRNF13和LOC284454的表達情況聯合用于腫瘤的輔助診斷，進一步提升診斷的準確性，具有深遠的臨床意義和重要的推廣應用前景。

技術領域

本發明屬于腫瘤分子生物學技術領域，具體涉及一種檢測環狀RNA RNF13 和長鏈非編碼RNALOC284454的試劑在制備腫瘤輔助診斷制劑上的應用和相應的試劑盒。

背景技術

惡性腫瘤嚴重危害著人類的健康，近年來中國惡性腫瘤發病率呈現上升的趨勢。據中國癌癥統計中心統計，惡性腫瘤新發病數約為380.4萬例，其中男性患者211.4萬例，女性患者169.0萬例，大約每一天超過1萬人次能被確診為癌癥，大約每分就有7人次被確診為癌癥。惡性腫瘤發病率為278.07/10萬，其中男性惡性腫瘤的發病率為301.67/10萬，女性惡性腫瘤發病率為253.29/10萬。惡性腫瘤發病率的中標率為190.63/10萬(人口標準率按2000年中國的標準人口結構), 惡性腫瘤發病率世標率為186.53/10萬(人口標準率按Segi's世界標準人口結構)， 0-74歲的累積發病率大約為21.58％。惡性腫瘤死亡率大約為167.89/10萬，其中中標率約106.98/10萬，世標率約106.09/10萬，0-74歲的累積死亡率約為12.00％。

據美國癌癥協會(ACS)統計，美國惡性腫瘤預計新發病數約173.5萬例，日均新發4700例。美國惡性腫瘤的發病率穩步下降，同時惡性腫瘤死亡率每年以1.5％的速度下降。美國惡性腫瘤發病率的明顯下降，可能歸因于控制吸煙、推廣多層次癌癥篩查及癌癥新型療法的廣泛應用。

由此可見，減少惡性腫瘤的發病因素、有效的早期診斷及新型癌癥治療方法的探索對癌癥的控制有著重大的作用。所以我國的醫學研究中正致力于尋找新型的腫瘤標志物，以期為惡性腫瘤的早期診斷，以及盡早方便準確的確診病情從而有利于治療提供新的途徑。

環狀RNA(circual RNA,circRNA)是一類新的RNA分子，其構型與傳統的線性RNA(含5’和3’末端)不同，環狀RNA分子呈封閉環狀結構(即5’和3’端首尾相連)，由于沒有游離的5’和3’末端，因此環狀RNA比線性RNA更加穩定。起初circRNA被認為是一種拼接錯誤的副產物，并未受到廣泛的關注，近年來，基于新一代測序技術的RNA-Sequencing廣泛應用推動了RNA許多領域的飛速發展，大量新的circRNA被發現，從而把circRNA推向了惡性腫瘤基因組學研究的舞臺中央。

circRNA作為一種新興的RNA，其行成以及功能機制吸引著越來越多的研究。隨著越來越多的circRNA被鑒別，發現一些circRNA的表達水平遠遠高于其相關線性基因的表達。circRNA以共價鍵形成環狀結構，多數circRNA是反向拼接的產物，在機體廣泛的表達，有時其表達水平是線性RNA的10倍，大多定位于胞質。CircRNA可以作為miRNA的分子海綿吸附miRNA、結合蛋白質、或作為基因轉錄和蛋白翻譯的調控因子等發揮重要的生物學功能，很有可能成為惡性腫瘤新的生物標志物和臨床治療靶標，為腫瘤的診斷及預后提供新思路。

長鏈非編碼RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一類長度超過200nt、缺少特異完整的開放閱讀框、無或很少有蛋白編碼功能的RNAs分子。最近的研究表明，lncRNAs通過在表觀遺傳、轉錄和轉錄后水平廣泛調節基因的表達，它們參與了生物體生長、發育、衰老及死亡等重要生命活動的調控。越來越多的研究表明lncRNAs的異常表達或功能缺失與腫瘤的發生發展密切相關。一些 lncRNAs分子在腫瘤的診斷和治療方面具有重要的意義，且可以作為腫瘤預后判斷新的分子標記。