[發(fā)明專利]一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810520727.0
• 申請日: 2018-05-28
• 公開（公告）號: CN108575758B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李肖娟;徐深錄;方良珍;李其
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州雪域生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 23211 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 劉景祥

本發(fā)明提供了一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物及其應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。該培養(yǎng)基組合物由基本培養(yǎng)基MS、果糖、葡萄糖、瓊脂、6?BA和2,4?D組成。本發(fā)明還提供了該組合物的應(yīng)用，主要用于天山雪蓮的愈傷組織誘導(dǎo)或愈傷組織繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：溫度23～25℃，光照時間9～15h/d，光照強度1900～2500lx。利用本發(fā)明培養(yǎng)基組合物進行天山雪蓮的組織培養(yǎng)得到的愈傷組織干重和總黃酮含量與現(xiàn)有技術(shù)相比，均有顯著提高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體而言，涉及一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

植物細(xì)胞具有全能性，一個植物細(xì)胞具有與親本植物完全相同的遺傳信息，不但具有發(fā)育成完整植株的能力，并且具有整株植物所具有的合成化合物的能力，通過植物細(xì)胞培養(yǎng)可以獲得親本植物的主要藥用活性成分，這也就為藥用活性成分的生產(chǎn)提供了新的途徑。

天山雪蓮(SaussureainvolucrataKar.etKir.)，又名新疆雪蓮，大苞雪蓮，系菊科鳳毛菊屬多年生草本植物，是一種極有開發(fā)和利用價值的民族藥。雪蓮在醫(yī)藥上應(yīng)用已有數(shù)百年的歷史，早在八世紀(jì)藏族古代藥物文獻(xiàn)《月王藥珍》就有雪蓮的記載，在清代，趙學(xué)敏所著的《本草綱目拾遺》一書中更把天山雪蓮奉為雪蓮藥材的正品。天山雪蓮民間主要用來除寒、壯陽、調(diào)經(jīng)止血、祛痰及治療風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、癰瘡腫毒和高山反應(yīng)等病癥。現(xiàn)代藥理研究表明，天山雪蓮主要具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗癌、抗衰老、擴張血管、降血壓、清除自由基、抗疲勞、抗早孕、終止妊娠、收縮子宮、以及治療糖尿病等多種藥理作用。天然天山雪蓮次生代謝產(chǎn)物成分復(fù)雜，具有藥理活性的化合物主要集中在黃酮、生物堿和多糖類。研究發(fā)現(xiàn)，天山雪蓮總黃酮和總生物堿具有較強的抗炎、鎮(zhèn)痛、抗輻射和擴張血管作用。

天山雪蓮生于海拔2400～4000米的高山雪線附近的高山流石灘、高山沼澤草地、高山草坡以及高山山頂碎石間，是一種高原多年生珍稀草本植物。自然條件下由于生長環(huán)境特殊，3至5年才能開花結(jié)果，花期時種子在山間隨風(fēng)飄散，只有遇到適宜環(huán)境的種子才有可能萌發(fā)和生長，故自然繁殖率較低。由于長期以來對雪蓮的掠奪性采挖，加上自然環(huán)境中種子發(fā)芽率低，繁殖困難，生長緩慢，野生天山雪蓮已處于瀕危的境地，1996年中國已將天山雪蓮列為二級瀕危保護植物，天山雪蓮是唯一列入《中國植物紅皮書》的雪蓮植物，是中國國家三級瀕危物種。2000年國務(wù)院13號文件已明令禁止采挖野生雪蓮。

由于天山雪蓮嚴(yán)苛的生長條件和較低的繁殖率，加上人們長期的過度采挖，使天山雪蓮資源嚴(yán)重不足，雪蓮物種瀕臨滅絕。天山雪蓮為高山特有品種，通過對其化學(xué)成分和藥理活性分析比較發(fā)現(xiàn)，特定生長環(huán)境對該植物體內(nèi)特殊成分的形成、積累和遺傳有著特殊作用，因此實現(xiàn)其人工栽培較難，同時野生天山雪蓮資源已難以滿足臨床藥用開發(fā)的需要，運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進行雪蓮次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)的研究越來越受到人們的重視。通過植物組培工程培育富含黃酮的天山雪蓮培養(yǎng)物可為解決這一問題提供切實可行的途徑。

鑒于此，本發(fā)明提供一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物及其應(yīng)用方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物及其應(yīng)用方法。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供一種天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物，天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物由基本培養(yǎng)基MS、果糖、葡萄糖、瓊脂、6-BA(6-芐基氨基嘌呤)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)組成。

進一步地，在本發(fā)明較佳的實施例中，天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物在每升MS基本培養(yǎng)基中含果糖10～25g、葡萄糖5～20g、瓊脂5～8g、6-BA0.6～1.0mg和2,4-D 1.0～2.0mg。

進一步地，在本發(fā)明較佳的實施例中，天山雪蓮組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基組合物在每升MS基本培養(yǎng)基中含果糖20g、葡萄糖10g、瓊脂6g、6-BA 0.8mg和2,4-D1.5mg。