[發明專利]WDR1基因在制備非小細胞肺癌治療和檢測產品中的應用

有效

• 申請號: 201810517088.2
• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN108660212B
• 公開（公告）日: 2021-04-27
• 發明（設計）人: 袁白銀;張瑞瑞;劉鐘穎;胡繼盛;王瓊;張同存
• 申請（專利權）人: 武漢科技大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/12;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 鐘鋒;徐曉琴

1.人WDR1基因表達量檢測試劑盒在制備非小細胞肺癌篩查檢測產品和非小細胞肺癌治療效果預后檢測產品中的應用。

2.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述檢測試劑盒至少包括用于擴增核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示人WDR1基因片段的特異性引物對，所述特異性引物對的上游引物序列如SEQ ID NO:2所示，所述特異性引物對的下游引物序列如SEQ ID NO:3所示。

3.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述檢測試劑盒還包括用于擴增內參肌動蛋白基因b-actin的特異性引物對，所述特異性引物對的上游引物序列如SEQ ID NO:4所示，所述特異性引物對的下游引物序列如SEQ ID NO:5所示。

4.根據權利要求1所述應用，其特征在于，具體包括如下步驟：

（1）采集受試者的NSCLC癌組織樣品和正常組織樣品，分別提取癌組織樣品和正常組織樣品的總RNA；然后將總RNA反轉錄為cDNA；

（2）利用引物分別進行實時熒光定量PCR檢測NSCLC癌組織樣品和正常組織樣品中WDR1基因片段和內參b-actin基因的表達水平，對擴增產物定量和均一化后，進行數據分析；計算所述WDR1基因片段的Ct與內參肌動蛋白基因的Ct值之差ΔΔCt，根據ΔΔCt計算WDR1基因的相對表達量；

（3）采用群體測定值分布比較法，將步驟（2）中所述WDR1基因片段在NSCLC癌組織樣品中的相對表達量與在正常組織樣品中的相對表達量進行比較，若所述WDR1基因在NSCLC癌組織樣品中的相對表達量高于在正常組織樣品中的相對表達量，則預示肺非小細胞癌變的風險較高或非小細胞肺癌治療預后效果差。

5.人WDR1基因功能表達抑制劑在制備非小細胞肺癌基因治療藥物中的應用，其特征在于，所述人WDR1基因功能表達抑制劑為shRNA，所述shRNA序列包括兩個靶向人WDR1基因編碼DNA的反向重復序列，中間由一莖環序列分隔；其中，兩個反向重復序列分別為人WDR1基因的shRNA靶點序列及其互補序列，所述人WDR1基因的shRNA靶點序列及其互補序列如SEQID NO:6和SEQ ID NO:7所示。