[發明專利]一種基于纖維素化磁性納米顆粒富集和分離厭氧纖維降解菌的方法

有效

• 申請號: 201810515019.8
• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN110527640B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 趙圣國;王加啟;鄭楠;邢磊;張養東;李松勵
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;B01J20/24;B01J20/30;B01J20/28
• 代理公司: 北京知元同創知識產權代理事務所(普通合伙) 11535
• 代理人: 劉元霞

1.一種基于纖維素化磁性納米顆粒富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

向纖維素化磁性納米顆粒中加入細菌，所述細菌中含厭氧纖維降解菌；進行混合和孵育；然后利用磁鐵吸附，進行分離，得到厭氧纖維降解菌；其中，所述纖維素化磁性納米顆粒包括磁性納米顆粒和包被于顆粒表面的纖維素層。

2.根據權利要求1所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述磁性納米顆粒選自四氧化三鐵納米顆粒。

3.根據權利要求1或2所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述磁性納米顆粒的平均粒徑為10-30nm。

4.根據權利要求1或2所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述纖維素化磁性納米顆粒的濃度為0.1-10mg/mL；

所述細菌的濃度為(0.8-1.2)×10⁸CFU/mL。

5.根據權利要求1所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述混合的時間為5分鐘-60小時。

6.根據權利要求1所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述孵育的時間不超過60小時。

7.根據權利要求1所述富集和分離厭氧纖維降解菌的方法，其特征在于，所述利用磁鐵吸附，進行分離具體為：利用磁鐵吸附，然后吸取上清并加入厭氧稀釋液，清洗后再加入厭氧稀釋液。

8.纖維素化磁性納米顆粒的用途，其特征在于，所述纖維素化磁性納米顆粒用于富集和分離厭氧纖維降解菌；

所述纖維素化磁性納米顆粒包括磁性納米顆粒和包被于顆粒表面的纖維素層；

所述纖維素化磁性納米顆粒通過包括以下步驟的制備方法制備得到：

(1)將纖維素分散在堿性溶液中，得到纖維素分散液；

(2)將磁性納米顆粒和上述纖維素分散液混合，進行反應，得到纖維素化磁性納米顆粒。

9.根據權利要求8所述的用途，其特征在于，磁性納米顆粒和纖維素分散液的混合體系中，所述磁性納米顆粒濃度為7-28mg/mL；

所述磁性納米顆粒的平均粒徑為10-30nm。

10.根據權利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述磁性納米顆粒的制備方法包括：將FeCl₂和FeCl₃的混合物在堿性條件下進行超聲反應，得到磁性納米顆粒。

11.根據權利要求10所述的用途，其特征在于，超聲反應結束后，還包括磁分離和清洗的步驟。

12.根據權利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述纖維素分散液中的堿性溶液為氫氧化鈉、尿素或二者的混合溶液。

13.根據權利要求8或9所述的用途，其特征在于，步驟(2)中，所述反應的溫度為室溫；

步驟(2)中，所述反應的時間為5-15分鐘。

14.根據權利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述制備方法還包括在反應完成后，對纖維素化磁性納米顆粒進行磁分離，清洗的步驟。

15.根據權利要求14所述的用途，其特征在于，所述磁分離步驟中磁鐵捕獲的時間為2-8分鐘。

16.根據權利要求14所述的用途，其特征在于，所述清洗使用的溶劑為水。

17.根據權利要求14所述的用途，其特征在于，所述清洗洗至pH＝7。