[發(fā)明專利]一種靶向EGFR的嵌合抗原受體、嵌合抗原受體T細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用在審
申請?zhí)枺?/td> | 201810513550.1 | 申請日: | 2018-05-25 |
公開(公告)號: | CN110526985A | 公開(公告)日: | 2019-12-03 |
發(fā)明(設(shè)計)人: | 萬曉春;劉綠艷;唐超;李欣 | 申請(專利權(quán))人: | 深圳賓德生物技術(shù)有限公司 |
主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
代理公司: | 44202 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 | 代理人: | 郝傳鑫;熊永強(qiáng)<國際申請>=<國際公布> |
地址: | 518055 廣東省深*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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摘要: | |||
搜索關(guān)鍵詞: | 嵌合抗原 靶向 制備方法和應(yīng)用 細(xì)胞免疫作用 氨基酸序列 激活T細(xì)胞 細(xì)胞 細(xì)胞活力 正常細(xì)胞 專一性 殺傷 損傷 | ||
1.一種靶向EGFR的嵌合抗原受體,其特征在于,所述靶向EGFR的嵌合抗原受體CAR-EGFR包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
2.如權(quán)利要求1所述的靶向EGFR的嵌合抗原受體,其特征在于,所述靶向EGFR的嵌合抗原受體CAR-EGFR的編碼基因包括如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。
3.一種靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞,其特征在于,包括靶向EGFR的嵌合抗原受體CAR-EGFR,所述CAR-EGFR包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
4.如權(quán)利要求3所述的靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞,其特征在于,所述CAR-EGFR的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。
5.一種重組病毒載體,其特征在于,所述重組病毒載體包括如權(quán)利要求3-4任一項(xiàng)所述的靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞的CAR-EGFR的編碼基因。
6.如權(quán)利要求5所述的重組病毒載體,其特征在于,所述CAR-EGFR的編碼基因包括如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。
7.一種宿主細(xì)胞,其特征在于,所述宿主細(xì)胞包括如權(quán)利要求5-6任一項(xiàng)所述的重組病毒載體。
8.一種靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞的制備方法,其特征在于,包括:
(1)提供靶向EGFR的嵌合抗原受體CAR-EGFR的編碼基因,所述CAR-EGFR的編碼基因包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列所對應(yīng)的核苷酸序列;
(2)將所述CAR-EGFR的編碼基因插入到pWPXLD載體中,得到pWPXLD-CAR-EGFR重組質(zhì)粒;
(3)將所述pWPXLD-CAR-EGFR重組質(zhì)粒與包膜質(zhì)粒、包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞,得到重組慢病毒;
(4)將所述重組慢病毒感染CD3陽性T淋巴細(xì)胞,獲得靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞。
9.如權(quán)利要求8所述的靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞的制備方法,其特征在于,所述CAR-EGFR的編碼基因包括如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。
10.一種如權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的靶向EGFR的嵌合抗原受體CAR-EGFR、如權(quán)利要求3-4任一項(xiàng)所述的或如權(quán)利要求8-9所述的制備方法制得的靶向EGFR的嵌合抗原受體T細(xì)胞、或如權(quán)利要求5-6任一項(xiàng)所述的重組病毒載體或如權(quán)利要求7所述的宿主細(xì)胞或在制備預(yù)防、診斷和治療惡性腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
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