[發(fā)明專利]一種熒光標(biāo)記大分子季銨鹽及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810499534.1
• 申請日: 2018-05-23
• 公開（公告）號: CN108752544B
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張安強(qiáng);張倡;鐘偉強(qiáng);林雅鈴;董辰韻;封曦翔;常瑤瑤
• 申請（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類號: C08F293/00
• 分類號: C08F293/00;C08G77/385;C08G77/38;C08G77/20;G01N21/64
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運(yùn)貞

1.一種熒光標(biāo)記大分子季銨鹽的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）改性熒光素的合成：在有機(jī)溶劑A中加入熒光素，然后在惰性氣體氣氛中加入氯乙酰氯進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束，經(jīng)產(chǎn)物純化，得到改性的熒光素；

（2）熒光標(biāo)記大分子季銨鹽的制備：將物質(zhì)A和改性熒光素溶于有機(jī)溶劑B，在惰性氣體氣氛中反應(yīng)；再加入氯化芐，在惰性氣體氣氛中反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束，經(jīng)產(chǎn)物純化，得到熒光標(biāo)記的大分子季銨鹽；

所述的物質(zhì)A為硅氧烷與甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的兩嵌段共聚物或聚二甲氨基丙基甲基丙烯酰胺；

所述的硅氧烷與甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的兩嵌段共聚物通過如下步驟制備得到：

1）乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷聚合物的合成：在有機(jī)溶劑C中加入六甲基環(huán)三硅氧烷，在惰性氣體氣氛中，以正丁基鋰引發(fā)聚合反應(yīng)，最后加入二甲基乙烯基氯硅烷終止聚合反應(yīng)；對反應(yīng)得到的產(chǎn)物純化，得到透明油狀液體產(chǎn)物，為乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷；

2）羥基封端的聚二甲基硅氧烷的合成：將有機(jī)溶劑D、巰基乙醇、步驟1）得到的乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷和催化劑混合，得到澄清的溶液，用紫外光引發(fā)自由基加成反應(yīng)，對反應(yīng)得到的產(chǎn)物純化，得到羥基封端的聚二甲基硅氧烷；

3）端基帶溴的聚二甲基硅氧烷合成：在有機(jī)溶劑E中加入步驟2）得到的羥基封端的聚二甲基硅氧烷、三乙胺和2-溴異丁酰溴混合反應(yīng)；對反應(yīng)得到的產(chǎn)物純化，得到端基帶溴的聚二甲基硅氧烷；

4）聚硅氧烷和聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯兩嵌段共聚物的合成：將有機(jī)溶劑F、步驟3）得到的端基帶溴的聚二甲基硅氧烷、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、CuBr和N, N, N', N'',N''-五甲基二乙烯基三胺混合，在惰性氣體氣氛中經(jīng)行聚合反應(yīng)，對反應(yīng)得到的產(chǎn)物純化，得到淡黃色粘稠液體產(chǎn)物，即硅氧烷與甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的兩嵌段共聚物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光標(biāo)記大分子季銨鹽的制備方法，其特征在于：

步驟（1）中所述的氯乙酰氯的摩爾用量按熒光素：氯乙酰氯=摩爾比1：（1～1.3）配比計(jì)算；

步驟（1）中所述的有機(jī)溶劑A為丙酮；

步驟（1）中所述的反應(yīng)的時(shí)間為8 h；

步驟（2）中所述的有機(jī)溶劑B為甲醇和無水乙醇中的一種或兩種；

步驟（2）中所述的反應(yīng)條件為于50～80 ℃冷凝回流反應(yīng)12～36 h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光標(biāo)記大分子季銨鹽的制備方法，其特征在于：

步驟（1）中所述的有機(jī)溶劑A的體積用量相當(dāng)于熒光素質(zhì)量的80～150倍；其中，體積用量的單位為mL，質(zhì)量的單位為g；

步驟（1）中所述的氯乙酰氯的加入方式為滴加加入；

步驟（1）中所述的純化的步驟為：將產(chǎn)物過濾，然后將得到的粉末放在真空烘箱中50℃烘干，得到的橙黃色粉末為改性后的熒光素；

步驟（2）中所述的純化步驟為：減壓蒸餾出部分醇，加入大量無水乙醚，然后倒掉上清液，再放入50 ℃真空烘箱烘干，即得熒光標(biāo)記的大分子季銨鹽。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光標(biāo)記大分子季銨鹽的制備方法，其特征在于：

所述的聚二甲氨基丙基甲基丙烯酰胺通過如下步驟制備得到：將二甲氨基丙基甲基丙烯酰胺和偶氮二異丁腈在甲醇中反應(yīng)，得到聚二甲氨基丙基甲基丙烯酰胺。