[發明專利]一株魚源屎腸球菌R8的篩選及應用

有效

• 申請號: 201810499241.3
• 申請日: 2018-05-23
• 公開（公告）號: CN108660097B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 孫敬鋒;毛晴
• 申請（專利權）人: 天津農學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61P31/04;A23K10/18;A23K50/80;C12R1/01
• 代理公司: 天津市亦略知識產權代理事務所(普通合伙) 12250
• 代理人: 黎鵬

本發明提供一株從鯽魚腸道內篩選分離出的既安全又具有益生特性的屎腸球菌R8，菌株Enterococcus faecium，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物保藏中心，保藏編號為CGMCC NO.15229，保藏日期為2018年1月17日。該菌株耐熱性強，耐酸堿度寬泛，抗逆性高，益生性更加顯著，同時對常見水產致病菌如維氏氣單胞菌、溶血性葡萄球菌、副溶血弧菌、創傷弧菌均具有較明顯抑制作用，能夠作為飼料添加劑廣泛應用與水產養殖中。

技術領域

本發明屬于水產用微生物添加劑技術領域，涉及一種對水產常見致病菌維氏氣單胞菌、溶血性葡萄球菌、副溶血弧菌、創傷弧菌具有明顯抑制作用的屎腸球菌(Enterococcus faecium)菌株的分離鑒定、安全性試驗以及抗逆性能的鑒定及應用。

背景技術

目前，隨著人們對微生態產品的逐步認可和近年來政府對抗生素的使用限制愈來愈嚴，人們在尋求抗生素類產品的替代品時，將目光更多地轉向了綠色、環保、高效的微生態產品。乳酸菌作為一類重要益生菌，同時也是動物腸道內的重要優勢菌群，因其無毒、無殘留、無副用等特點，越來越成為飼料添加劑的熱門研究領域。不過由于乳酸菌類為厭氧菌，并且對高溫耐受性不強，這為乳酸菌產品的應用與開發帶來了障礙。而屎腸球菌具有乳酸菌類細菌中特有的抗逆性，在生產加工上有其獨特的優勢。因此，屎腸球菌在畜牧領域的微生態制劑，特別生物飼料添加劑應用技術上倍受親睞。

2008年中國農業部發布公告，在《飼料添加劑品種目錄》中明確規定飼用微生物添加劑的種類，屎腸球菌位列其中，成為了微生態制劑常用乳酸菌菌種。大量事實證明，屎腸球菌制劑在提高幼年畜禽體增重、提高動物免疫力、調節腸道微生態平衡，提高飼料報酬、減少腹瀉率、降低死亡率等方面均有很好的效果。

盡管屎腸球菌被廣泛應用，但在水產業方面，從水產動物自身中篩選出益生菌并應用的報道卻相對較少。水產養殖中使用的很多益生菌并不是從水產動物或者生活環境中篩選出來，而是來自某些陸生動物，這就造成益生菌株無法定殖或不穩定。只有從宿主本身篩選出的土著微生物才可以更好地適應環境，更高效的抑制病原菌，而那些非分離自魚類消化道的益生菌株，往往不能穩定地定殖在魚類消化道中。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術缺陷，提供一株從鯽魚腸道內篩選分離出的既安全又具有益生特性的益生菌。該菌株耐熱性強，耐酸堿度寬泛，抗逆性高，益生性更加顯著，同時對常見水產致病菌如維氏氣單胞菌、溶血性葡萄球菌、副溶血弧菌、創傷弧菌均具有較明顯抑制作用。利用16S rDNA方法鑒定該菌株為屎腸球菌(Enterococcus faecium)，并對其安全性、抗逆性及應用進行了相關試驗。

本發明的屎腸球菌R8，菌株Enterococcus faecium，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物保藏中心，保藏編號為CGMCC NO.15229，保藏日期為2018年1月17日。

屎腸球菌R8是從魚類腸道內分離篩選得到的，本發明采用鯽魚。

本發明的屎腸球菌R8能夠應用于水產養殖，有效定殖于腸道發揮益生作用，顯著提高水產生物存活率和增重率，對常見水產致病菌維氏氣單胞菌、溶血性葡萄球菌、副溶血弧菌、創傷弧菌均有明顯抑制作用。

本發明的屎腸球菌R8可以以飼料添加劑的形式使用，優選的摻拌量為2w％，菌液濃度為1.0×10⁸cfu/mL。

本發明具有如下優點：

(1)菌株來源于常見魚類(鯽魚)的腸道內容物，經分離篩選得到，被命名為屎腸球菌R8。對水產常見致病菌(維氏氣單胞菌、溶血性葡萄球菌、副溶血弧菌、創傷弧菌)具有明顯抑制作用，為替代抗生素添加劑提供有利依據。

(2)該菌株可耐受胃酸及小腸高膽鹽環境，可在腸道內定殖從而發揮益生作用。