[發明專利]一種含有EGFP基因的慢病毒載體及其構建方法在審
| 申請號: | 201810498429.6 | 申請日: | 2018-05-23 |
| 公開(公告)號: | CN108660160A | 公開(公告)日: | 2018-10-16 |
| 發明(設計)人: | 柴娟;李永玲;郭姍姍;張冰瑩;何文欣;石曉光;崔建奇 | 申請(專利權)人: | 寧夏醫科大學 |
| 主分類號: | C12N15/867 | 分類號: | C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司: | 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401 | 代理人: | 劉震 |
| 地址: | 750004 寧夏回族*** | 國省代碼: | 寧夏;64 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 慢病毒載體 構建 制備 酶切位點 神經系統 基本序列 實驗研究 轉染效率 細胞 亞克隆 | ||
1.一種含有EGFP基因的慢病毒載體,其特征在于,所述慢病毒載體包括EGFP基因序列、慢病毒載體pLKO.1‐puro的基本序列、AgeI酶切位點、Eco RI酶切位點。
2.根據權利要求1所述含有EGFP基因的慢病毒載體的制備方法,其特征在于,首先制備獲得EGFP基因,將EGFP基因亞克隆到pLKO.1‐Puro慢病毒載體上,制備獲得pLKO.1‐puro‐EGFP慢病毒載體。
3.根據權利要求2所述含有EGFP基因的慢病毒載體的制備方法,其特征在于,通過對pEGFP‐C1載體進行雙酶切,制備獲得EGFP基因。
4.根據權利要求3所述含有EGFP基因的慢病毒載體的制備方法,其特征在于,EGFP基因的制備具體為:利用AgeI和Eco RI對pEGFP‐C1載體進行雙酶切,獲得EGFP基因。
5.根據權利要求3所述含有EGFP基因的慢病毒載體的制備方法,其特征在于,pLKO.1‐Puro慢病毒載體上具備AgeI酶切位點和Eco RI酶切位點。
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