[發(fā)明專利]用于土壤修復的微生物制劑有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810486761.0 | 申請日： | 2018-05-18 |
| 公開（公告）號： | CN108624582B | 公開（公告）日： | 2020-09-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 謝悅波;陳求穩(wěn);何慶成;金波;姚竣耀 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇世邦生物工程科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N11/14 | 分類號： | C12N11/14;C12N11/10;B09C1/10;C12R1/01;C12R1/06 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 李瑤 |
| 地址： | 211800 江蘇省南京市浦口*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 土壤 修復 微生物 制劑 | ||
1.一種用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，該微生物制劑包括多孔載體和負載在所述多孔載體中的復合微生物菌劑；所述多孔載體包含硅藻土、硫酸鈣和海藻酸鈉；所述復合微生物菌劑包含節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719菌劑、沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)菌劑和ACC脫氨酶；所述微生物制劑由 粒徑分布在1～500微米的多孔微粒構(gòu)成，所述多孔微粒的孔徑在50～100nm范圍內(nèi)；沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)為沼澤紅假單胞菌2-8(Rhodopseudomonas palustris 2-8)；
所述的微生物制劑的制備方法包括以下步驟：
1)將節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719發(fā)酵液和沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)發(fā)酵液按照質(zhì)量比為1：1.2～1.5的比例混合均勻，得到復合菌劑；向所述復合菌劑中加入ACC脫氨酶，混合均勻，即得復合微生物菌液；
2)將硅藻土、海藻酸鈉、碳酸鈣和氯化鈣以1：1～2：0.2～0.3：0.2～0.3的質(zhì)量比在水中混合，超聲分散均勻，加入步驟1)制得的復合微生物菌液，混合均勻得到分散液；
3)向濃度為0.05～0.1mol/L的硫酸鎂溶液中逐滴滴加步驟2)制得的分散液，生成球狀顆粒沉淀，離心分離所述球狀顆粒沉淀，向分離得到的球狀顆粒沉淀中緩慢滴加稀鹽酸溶液，直至無氣泡生成，用水洗滌得到的固體物質(zhì)，離心，干燥，即得所述微生物制劑；
步驟2)中，加入的 硅藻土、海藻酸鈉、碳酸鈣和氯化鈣的總質(zhì)量與復合微生物菌液的質(zhì)量之比為0.2～0.3：1;
所述復合微生物菌液中，節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719發(fā)酵液的活菌含量為5×10 8～5×10 10cfu/g，沼 澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)發(fā)酵液的活菌含量為5×10 9～5×10 11cfu/ g，ACC脫氨酶的濃度為25～35U/mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，所述節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719發(fā)酵液的制備方法包括：將節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719培養(yǎng)到對數(shù)期，然后按培養(yǎng)基體積2％～5％的接種量將培養(yǎng)到對數(shù)期的菌種接種到LB培養(yǎng)基中，25～37℃下，搖床震蕩120～180rpm，培養(yǎng)40～48小時，得到節(jié)桿菌(Arthrobacter sp.)LHM7719發(fā)酵液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)為沼澤紅假單胞菌2-8(Rhodopseudomonas palustris 2-8)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，所述沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)發(fā)酵液的制備方法包括：將沼澤紅假單胞菌2-8(Rhodopseudomonas palustris 2-8)培養(yǎng)到對數(shù)期，然后按培養(yǎng)基體積2％～5％的接種量將培養(yǎng)到對數(shù)期的菌種接種到培養(yǎng)基A中，光照厭氧條件下，28～30℃下培養(yǎng)48～96小時，得到所述沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)發(fā)酵液；所述培養(yǎng)基A包括水和以下質(zhì)量分數(shù)的組分：氯化銨0.1％、磷酸氫鈉0.05％、硫酸鎂或氯化鎂0.02％、氯化鈉0.2％、酵母膏或蛋白胨0.1～0.2％，所述培養(yǎng)基A的pH為6.8～7.1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，所述碳酸鈣由粒徑為200～300目的碳酸鈣顆粒組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于土壤修復的微生物制劑，其特征在于，所述稀鹽酸溶液濃度為0.01～0.05mol/L。
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