[發明專利]新重組因子C、其制造方法、及內毒素的測定法

在審

• 申請號: 201810483329.6
• 申請日: 2013-12-10
• 公開（公告）號: CN108642030A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 水村光;小田俊男;川畑俊一郞
• 申請（專利權）人: 生化學工業株式會社
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;G01N33/569;G01N33/579
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇;李茂家

1.一種用于將耐鹽離子性賦予鱟的因子C的方法，所述方法包括：

在作為宿主細胞的人的細胞或中國倉鼠的細胞中重組表達所述鱟的因子C，

其中所述因子C，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，具有較多的(α-2,3)鍵的末端唾液酸。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述鹽離子選自由鈉離子、鉀離子、鈣離子、和鎂離子組成的組。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述因子C，在21mM的檸檬酸鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述因子C，在52mM的碳酸氫鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述因子C，在214mM的氯化鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述因子C，在16mM的硫酸鎂的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

7.根據權利要求1所述的方法，其中所述鱟的因子C為下述(A)、

(B)、(C)、或(D)所示的蛋白質：

(A)包含序列號2所示的氨基酸序列的蛋白質；

(B)包含相對于序列號2的氨基酸序列具有90％以上的序列同源性或同一性、且具有因子C的活性的氨基酸序列的蛋白質；

(C)包含序列號4所示的氨基酸序列的蛋白質；

(D)包含相對于序列號4的氨基酸序列具有90％以上的序列同源性或同一性、且具有因子C的活性的氨基酸序列的蛋白質。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述鱟選自由東方鱟、美洲鱟、和圓尾鱟組成的組。

9.一種用于在鹽離子的存在下的內毒素測定的水溶性鱟的因子C的制造方法，所述方法包括：

在作為宿主細胞的人的細胞或中國倉鼠的細胞中重組表達所述鱟的因子C，

其中所述因子C，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，具有較多的(α-2,3)鍵的末端唾液酸。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述方法包括：

回收作為溶液的表達的鱟的因子C。

11.根據權利要求9所述的方法，其中所述鹽離子選自由鈉離子、鉀離子、鈣離子、和鎂離子組成的組。

12.根據權利要求9所述的方法，其中所述因子C，在21mM的檸檬酸鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

13.根據權利要求9所述的方法，其中所述因子C，在52mM的碳酸氫鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

14.根據權利要求9所述的方法，其中所述因子C，在214mM的氯化鈉的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。

15.根據權利要求9所述的方法，其中所述因子C，在16mM的硫酸鎂的存在下，與將Sf9用作宿主細胞所表達的鱟的因子C相比，顯示出較高的殘留活性。