[發明專利]抗鴨生長遲緩病毒的單克隆抗體、雜交瘤細胞株及其應用

有效

• 申請號: 201810483132.2
• 申請日: 2018-05-18
• 公開（公告）號: CN110498853B
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發明（設計）人: 李澤君;李雪松;池秋燕
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院上海獸醫研究所（中國動物衛生與流行病學中心上海分中心）
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C12N5/20;G01N33/569
• 代理公司: 上海序倫律師事務所 31276
• 代理人: 周東萍

本發明公開了一種抗鴨生長遲緩病毒的單克隆抗體。本發明還公開了檢測鴨生長遲緩病毒抗體的試劑盒及上述單克隆抗體在制備診斷鴨生長遲緩病毒病的產品中的應用。本發明檢測鴨生長遲緩病毒抗體的試劑盒，具有良好的特異性和敏感性，適用于鴨生長遲緩病毒病流行病學調查和疾病診斷，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明涉及免疫化學技術領域，尤其涉及一種抗鴨生長遲緩病毒的單克隆抗體、雜交瘤細胞株、以及應用該單克隆抗體檢測鴨生長遲緩病毒特異性抗體的阻斷ELISA試劑盒。

背景技術

隨著我國養殖業的迅速發展，動物傳染病不斷爆發，不僅給養殖業造成嚴重的影響，給我國的經濟造成巨大的損失，更給動物生命以及人類健康帶來嚴峻的威脅。近年來我國出現了一種以發病鴨精神萎靡、站立不穩、生長發育遲緩為主要特征的新發傳染性疾病。該新發疫病的易感動物為櫻桃谷鴨，發病日齡主要集中在10～25日齡，少數鴨群于5～14日齡也有發病的癥狀。該病一年四季均可發生流行，發病率不高，由早期的0.1％～0.5％逐步提升至現在的10％～15％。

該新發病最初是通過采集現地發病鴨的實質性器官，經過病毒分離培養和分子生物學手段等方法，分離出的一株未知病毒，經電子顯微鏡觀察發現該病毒粒子直徑在70～100nm之間，有囊膜包裹，經核酸鑒定，確定該病毒為一種新型病毒，并命名為鴨生長遲緩病毒(SHuk2株)。

雖然該病不致死鴨子，但是能引起鴨子生長緩慢，殘次率升高，造成巨大的經濟損失。因此建立一種針對該新發疫病的快速檢測方法，確定該病臨床感染情況及在宿主體內的分布情況，為該疾病的預防控制提供技術支持，顯得十分重要。

發明內容

本發明要解決目前沒有特異性針對鴨生長遲緩病毒的抗體檢測方法的技術問題，提供一種抗鴨生長遲緩病毒的單克隆抗體，該單克隆抗體可用于特異、靈敏地檢測鴨生長遲緩病毒。

此外，還需要提供一種應用上述單克隆抗體檢測鴨生長遲緩病毒抗體的試劑盒。

為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現:

在本發明的一個方面，提供了一種一種抗鴨生長遲緩病毒的單克隆抗體。

優選的，所述單克隆抗體由保藏號為CCTCC NO：C2018101的雜交瘤細胞株產生。

在本發明的另一方面，還提供了一種產生上述單克隆抗體的雜交瘤細胞株。優選的，該雜交瘤細胞株的保藏號為CCTCC NO：C2018101。

在本發明的另一方面，還提供了一種檢測鴨生長遲緩病毒抗體的試劑盒，包含上述單克隆抗體。

優選的，本發明試劑盒還包含ELISA酶標板、鴨生長遲緩病毒抗原、酶標二抗、顯色液、陽性對照血清、陰性對照血清。

優選的，所述抗原的最佳包被濃度為1:400倍稀釋；所述待測血清的最佳稀釋倍數為1:10，待測血清的作用時間最佳為37℃1h；所述單克隆抗體的工作濃度優選為1:20稀釋。

所述試劑盒的使用方法包括以下步驟：

用純化的滅活鴨生長遲緩病毒抗原包被ELISA酶標板；

將待測血清與包被抗原作用后，依次加入權利要求1或2所述的單克隆抗體、酶標二抗和顯色液；

利用酶標儀讀取吸光度值OD_450nm,并按公式：阻斷率PI(％)＝1-待測血清的OD_450nm/陰性對照血清的OD_450nm×100％，計算待測血清的抑制率，得檢測結果。