[發明專利]一種開放式發酵培養微生物菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810480884.3
• 申請日: 2018-05-18
• 公開（公告）號: CN108410780A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 田稼;吳小杰;孫超;路鵬鵬;李飛
• 申請（專利權）人: 陜西省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所 11308
• 代理人: 秦力軍

本發明涉及農業領域，具體涉及一種開放式發酵培養微生物菌劑及其制備方法和應用。通過將膠質芽孢桿菌活化后進行擴大培養，再接種于蘋果枝條進行發酵培養得成品。利用開放式條件進行，種子培養基和發酵培養基均不需要滅菌，不需要其他設備和不使用連續培養和半連續培養實現了膠質芽孢桿菌的高密度培養。因此菌劑易得，能夠實現大量生產，成本也會相應降低，卻能夠大量增產，因此實現低成本高收益。

技術領域

本發明涉及農業領域，具體涉及一種開放式發酵培養微生物菌劑及其制備方法和應用。

背景技術

蘋果屬于多年生作物，富含鉀、鎂、鋅等微量元素，不僅對身體好，而且還能養顏美容。但是傳統的肥料都具有一定的副作用，不僅會給果實帶來一定程度的污染，還會對土壤與周圍環境造成污染。長期使用會造成大量肥料殘留在地上，不僅造成土壤質量的嚴重下降，也會對水體造成污染，很多都對人體有強烈的毒副作用，并且造價高、生產工藝復雜，對農業的可持續發展以及人類的生存環境造成威脅。由于化學肥料的過量使用和作物的連年種植，土壤開始大面積板結，土壤中的有益菌群越來越少，重茬、根結線蟲等土傳病害日益嚴重，還會致使肥料利用率低,影響蘋果產量的提高。所以，一切優質、高產的果實都必須建立在安全、肥沃的土壤之上，而決定土壤性質的需要肥料的參與。開發高效安全的微生物有機肥料已經成為發展的趨勢。

發明內容

本發明為了解決現有技術中存在的不足，本發明的目的是提供一種開放式發酵培養微生物菌劑及其制備方法和應用。

為達到上述目的，本發明主要提供如下技術方案：

一種開放式發酵培養微生物菌劑，將膠質芽孢桿菌活化后進行擴大培養，再接種于蘋果枝條進行發酵培養得成品。

具體方法采用如下步驟：

(1)試管活化培養：將膠質芽孢桿菌接種于膠質芽孢桿菌試管斜面培養基中進行活化培養，制得膠質芽孢桿菌試管斜面菌種；

(2)液體搖瓶培養：將步驟(1)所制得的膠質芽孢桿菌試管斜面菌種接種到裝有液體搖瓶培養基的搖瓶中，進行培養，制得膠質芽孢桿菌液體搖瓶菌種；

(3)固體發酵培養：將步驟(2)所制得的膠質芽孢桿菌液體搖瓶菌種開放式環境中接種到粉碎的蘋果枝條上進行固體發酵培養，制成膠質芽孢桿菌固體菌劑；

(4)粉碎：將步驟(3)所制得的膠質芽孢桿菌固體菌劑進行粉碎，即得成品。

其中，所述試管活化培養：接種一環膠質芽孢桿菌菌種到膠質芽孢桿菌試管斜面培養基中，37℃培養24h，制得試管斜面菌種于24℃保存備用。

其中，所述種子液培養：接種一環步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有20～150mL液體搖瓶培養基的三角瓶中，三角瓶在轉速為50～200轉/分，溫度30℃的條件下，搖床培養18-24h，制成膠質芽孢桿菌液體搖瓶菌種。

其中，所述固體發酵培養：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于粉碎的蘋果枝條上進行固體發酵培養，培養溫度20～25℃，培養6-8天；

其中，所述粉碎：將步驟(3)所制得的膠質芽孢桿菌固體菌劑進行40目粉碎，即得成品，其中，膠質芽孢桿菌菌數8～9×10⁸cfu/g。

一種開放式發酵培養微生物菌劑在蘋果種植增產方面的應用。

本發明由于采取以上技術方案，其具有以下優點：

利用開放式條件進行，種子培養基和發酵培養基均不需要滅菌，不需要其他設備和不使用連續培養和半連續培養實現了膠質芽孢桿菌的高密度培養。因此菌劑易得，能夠實現大量生產，成本也會相應降低，卻能夠大量增產，因此實現低成本高收益。

附圖說明