[發(fā)明專利]一種咔唑基雙光子熒光探針及其制備方法和用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810478096.0
• 申請(qǐng)日: 2018-05-18
• 公開（公告）號(hào): CN108484479B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮燕;黃銀亮;王文娟;李長(zhǎng)虎;汪嘯;周虎;祖潤(rùn)奇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D209/86
• 分類號(hào): C07D209/86;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司 34101
• 代理人: 喬恒婷

1.一種咔唑基雙光子熒光探針，是以咔唑?yàn)槟阁w，其特征在于其結(jié)構(gòu)式如下：

2.一種權(quán)利要求1所述的咔唑基雙光子熒光探針的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟1：中間體1的合成

將KOH 35.8mmol、KI 2.39mmol和1,4-二溴丁烷35.8mmol的混合物加熱至60℃，反應(yīng)1小時(shí)后緩慢加入3,6-二碘代咔唑23.9mmol，繼續(xù)加熱回流反應(yīng)12小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，加入H₂O，用二氯甲烷萃取混合物，將有機(jī)相蒸發(fā)，得到粗殘余物，通過柱色譜法純化，得到中間體1；

所述中間體1的結(jié)構(gòu)式如下所示：

步驟2：中間體2的合成

將中間體1 1.8mmol、4-乙炔苯甲醛5.4mmol、Pd₂(PPh₃)₂Cl₂ 0.007mmol、CuI 0.014mmol和Et₃N 5mL在無水和無氧條件下于30℃攪拌反應(yīng)12小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，將沉淀濾出并濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過柱色譜純化，得到中間體2；

所述中間體2的結(jié)構(gòu)式如下所示：

步驟3：Lyso-DCHO的合成

在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將中間體2 1.8mmol、KOH 1.08mmol、KI 1.08mmol和THF的混合物加熱至70℃，反應(yīng)1小時(shí)后加入嗎啉6mL，繼續(xù)加熱回流反應(yīng)36小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，過濾，蒸發(fā)濾液，得到粗產(chǎn)物，通過柱色譜法純化，得到淡黃色固體Lyso-DCHO。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：

步驟1中，柱色譜法純化時(shí)的洗脫液為石油和二氯甲烷按體積比10：1的比例混合得到。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：

步驟2中，柱色譜法純化時(shí)的洗脫液為石油和二氯甲烷按體積比4：1的比例混合得到。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：

步驟3中，柱色譜法純化時(shí)的洗脫液為石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯按體積比1:1:2的比例混合得到。

6.一種權(quán)利要求1所述的咔唑基雙光子熒光探針的用途，其特征在于：所述熒光探針用于制備定性檢測(cè)細(xì)胞溶酶體內(nèi)的Cys的檢測(cè)試劑。