[發明專利]一種軟脂固定液的制備方法

在審

• 申請號: 201810469010.8
• 申請日: 2018-05-16
• 公開（公告）號: CN108918212A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 侯傳玲;蔣雄玲;沈增麗;魏建國;徐峰;孫愛靜
• 申請（專利權）人: 紹興市人民醫院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 紹興市知衡專利代理事務所(普通合伙) 33277
• 代理人: 施春宜

本申請涉及一種軟脂固定液的制備方法，屬于測試用樣品制備技術領域。以甲醛、卵磷脂、無水乙醇和丙酮作為原料，將無水乙醇、甲醛和丙酮攪拌均勻后，加入卵磷脂，攪拌并使其溶解，形成的固定液中上述各原料的濃度分別為：甲醛50~150ml/L，卵磷脂30~70g/L，無水乙醇200~300 ml/L，丙酮200~300ml/L。將本申請應用于軟脂固定液的制備，特別是癌癥類樣本中淋巴結解剖取材中的固定，不僅保證了淋巴結的及時充分固定，減少病理科醫生的解剖取材時間，還確保了淋巴結細胞形態保存完整，無變形，免疫組化效果好，有效提高了淋巴結檢出數目和精確淋巴結轉移陽性率。

技術領域

本申請涉及一種軟脂固定液的制備方法，屬于測試用樣品制備技術領域。

背景技術

癌癥轉移的主要途徑為淋巴道，癌細胞經淋巴回流轉移至淋巴結，不但造成局部組織的破壞，而且在淋巴結隱匿，成為其它臟器轉移的發源地，切除包括原發灶和引流區域淋巴結的根治性手術是癌癥患者最為重要的手術治療方式。癌癥根治性手術后的淋巴結解剖與病理取材是臨床診療的重要步驟之一。有研究顯示，充分的淋巴結根治性切除能大幅度降低癌癥相關事件，即使所有淋巴結病理檢查均無轉移，對于患者的遠期存活率也有重要影響。淋巴結的轉移狀態往往是癌癥患者的獨立預后因素，切除的淋巴結數越多，患者的復發率和病死率越低，這種趨勢也體現在有淋巴結轉移的患者中。有研究證實，轉移的淋巴結最小直徑為0.4cm，淋巴結有無轉移單憑肉眼大體特征很難判斷。顯然，充分而確切地淋巴結檢查可以降低淋巴結假陰性的發生率，Axelsson等檢查了31679例乳腺癌患者的手術標本，提示切除的淋巴結越多，淋巴結的轉移率越高；與以10-14枚淋巴結取材為基數與以20枚淋巴結取材作為基數相比，能使直徑1-5mm的淋巴結陽性率由14.2％升高到25.9％，使直徑11-20mm淋巴結陽性率由38.6％升高到90.0％。癌癥區域淋巴結切除個數及轉移陽性率是影響患者預后的重要因素，也是制定治療方案的重要依據之一，全數淋巴結取材對確定癌癥分期、評估預后以及制定個體化治療方案具有重要意義。

目前，癌癥根治術標本的淋巴結解剖取材大都沿用傳統方法，即對新鮮或福爾馬林固定的手術標本，病理醫師采用刀切手摸的方法，根據經驗判斷通常包裹于脂肪組織中的淋巴結并取材。而淋巴結取材過程中最困難的就是脂肪組織過多，導致取得淋巴結數目不足，使得臨床病理分期不準確，嚴重影響病人手術后的治療方案，尤其是小于0.5cm的小淋巴結極易漏檢，而這些小淋巴結同樣存在轉移癌的可能。淋巴結解剖取材的數量、質量以及所需時間受脂肪含量、解剖技術甚至操作人員的責任心等多種因素的影響。臨床實際工作中急需能夠溶解妨礙淋巴結暴露和判斷的脂肪組織，并能保證淋巴結充分固定的方法。本研究即為解決這一臨床急需的問題而設計。

雖然已有腫瘤病理學家指出淋巴結收獲可能需要考慮脂肪溶解技術，近年來研究主要集中于脂肪溶解液在乳腺癌腋窩淋巴結清掃術中，以保護淋巴管，防止傳統腋清掃手術造成的上肢麻痹、疼痛、提肩運動障礙、上肢水腫、腋窩及胸部皮下積液等并發癥。關于包括常規乳腺癌改良根治術、胃及結腸癌根治術在內的臨床常見癌癥根治性手術后標本取材用的脫脂固定方法鮮見報道。張琴琴等將手術中的脂肪溶解液應用于乳腺常規改良根治術的新鮮標本，并與常規解剖取樣方法比較，提示用脂肪溶解液預處理標本可增加淋巴結檢出的數目、減低解剖難度以及縮短解剖時間。但是該方法存在的主要問題是不適用于臨床更為常見的固定標本。

基于此，做出本申請。

發明內容

針對現有淋巴結檢出技術所存在的上述缺陷，本申請提供一種全新的軟脂固定液的制備方法，該軟脂固定液不僅兼具了溶脂、固定、淋巴結染色的多重作用，在溶解經處理過的脂肪組織的同時，保證淋巴結結構的完整和最佳染色效果。

為實現上述目的，本申請采取的技術方案如下：