[發明專利]一種沼澤紅假單胞菌培養基及培養方法

在審

• 申請號: 201810468963.2
• 申請日: 2018-05-16
• 公開（公告）號: CN108587975A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 蘇善高;陳文艷;趙文青
• 申請（專利權）人: 廣西青又青生物肥業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A23K50/30;C12R1/01
• 代理公司: 北京君恒知識產權代理事務所(普通合伙) 11466
• 代理人: 譚月萍;黃啟行

本發明公開了一種沼澤紅假單胞菌培養基及培養方法，先進行培養基的配制，將沼澤紅假單胞菌菌株進行活化后接種至配制好的培養液中在適宜的溫度下培養3～5d后，在培養液中取少量進行鏡檢，鏡檢無雜菌且沼澤紅假單胞菌的數量達到5*10⁸～7*10⁸個，得到沼澤紅假單胞菌發酵液。本發明公開了一種成分簡單且制備方法簡便的液體培養基配方，用于富集沼澤紅假單胞菌，除此之外，其培養過程條件簡單，培養出的沼澤紅假單胞菌活菌含量高，穩定性能較好，使用效果好且保存時間長。

技術領域

本發明涉及微生物培養技術領域，特別涉及一種沼澤紅假單胞菌培養基及培養方法。

背景技術

光合細菌是自然界最廣泛存在的比較古老的、能進行光合作用而不產氧的特殊生理類群的原核微生物的總稱，具有原始光能合成體系，能在厭氧條件下進行不放氧的光合作用，是水體兼性厭氧層中主要的初級生產者，并在自然界的碳素、氮素、硫素轉化循環中起重要作用。它包括有紅螺菌科、著色菌科、綠桿菌科、綠色絲狀菌科4科。光合細菌廣泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥、土壤、極地或溫泉(包括高熱水體)以及高鹽、高有機質含量等不同生態環境中，它可以光能異養、化能異養、光能自養方式生活，存在著好氧、厭氧和兼性厭氧類型，能利用多種基質。光合細菌細胞內含有細菌色素(如類胡蘿卜素、菌綠素)、卟啉類化合物、泛醌等多種有效的自由基清除物質，可保護細胞膜、DN等自身細胞的重要組份不受損傷。光合細菌具有多重代謝方式，尤其在對高濃度有機廢水的凈化處理中，表現出負荷低、效率高及投資少的優點；在禽畜養殖方面，光合細菌可作為一種飼料蛋白補充，還可以起到益生菌的作用。在水產養殖方面，有改善水質，預防魚病的作用，對產量和成活率均有顯著的提高。在光合細菌中沼澤紅假單胞菌的應用最為廣泛，是我國農業部頒布12種允許在飼料中直接添加的活體微生物之一。

沼澤紅假單胞菌是光合細菌的代表菌株之一，別名：紅假菌。被應用于農業、漁業、環保、醫藥等領域。由于細菌菌體富含蛋白質、維生素、類胡蘿卜素等營養物質，作為飼料添加劑可以有效地提高飼料效率，促進生長。同時，由于光合細菌體積小，適合在水產養殖業中作為開口餌料使用。此外，它作為益生菌對有害菌起到抑制和排斥作用，能保持正常的菌群，促進營養物質的消化吸收，參與消化酶生成及B族維生素的合成，減少氨及有害物質的產生，提高局部免疫力和抗病力。

沼澤紅假單胞菌是研究和應用較為廣泛的一種光合細菌，屬于外硫紅螺菌科紅假單胞菌屬，細胞直徑0.6－0.9μm，極生鞭毛運動或不運動，生長有極性，不對稱出芽分裂，革蘭氏染色陰性，光合色素為葉綠素a、h和類胡蘿卜素。其最佳生長方式是利用各種有機化合物作碳源和電子供體進行光照厭氧培養。在厭氧條件下以氫、硫代硫酸鈉、硫化氫等作電子供體可光自養生長。G+Cmol％為64.8－66.4。以沼澤紅假單胞菌液為添加劑的飼料產品是現代生物技術與動物微生態學、動物營養學相結合的產物。沼澤紅假單胞菌作為微生態制劑的研究，將對推動我國養殖業向著高效、綠色、生態、健康的方向發展具有重要意義，其應用前景也十分廣闊。

目前市面上的光合菌(沼澤紅假單胞菌)由于生產設備、工藝要求高，操作復壯，導致成本較高，難以在養殖戶中進行規模化推廣。

發明內容

本發明的目的在于：針對上述存在的問題，提供一種成分簡單且制備方法簡便的液體培養基配方，用于富集沼澤紅假單胞菌，除此之外，其培養過程條件簡單，培養出的沼澤紅假單胞菌活菌含量高，穩定性能較好，使用效果好且保存時間長。為了實現上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

一種沼澤紅假單胞菌培養方法，包括如下步驟：

(1)制備培養液：按照一定配比稱量好培養基的成分，混合后按比例添加純凈水，加熱溶解后攪拌均勻后調節PH值至7.2，冷卻至40℃備用；

(2)將沼澤紅假單胞菌的原菌液進行菌種活化后，通過光照培養至紅色單菌落出現，將單菌落按照10％的添加量添加到步驟(1)中制備的培養液中進行培養基接種；