[發(fā)明專利]鐵皮石斛的組織培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810464480.5
• 申請日: 2018-05-16
• 公開（公告）號: CN108684524A
• 公開（公告）日: 2018-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陶勝;古飛鳴
• 申請（專利權(quán)）人: 蕪湖市三山區(qū)綠色食品產(chǎn)業(yè)協(xié)會
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鐵皮石斛的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，所述組織培養(yǎng)方法包括：

1）將鐵皮石斛的莖芽進(jìn)行消毒以得到外植體；

2）將所述外植體置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)以得到原球莖；

3）將所述原球莖置于增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)以得到增殖苗；

4）將所述增殖苗置于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)以得到鐵皮石斛的幼苗；

其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基包括B5培養(yǎng)基、0.8-1.2mg/L的6-BA、0.1-0.3mg/L的IAA、0.01-0.05mg/L的腺嘌呤、0.01-0.03mg/L的葉酸、0.04-0.06mg/L的維生素B2；

所述增殖培養(yǎng)基包括B5培養(yǎng)基、0.2-0.5mg/L的6-BA、0.05-0.1mg/L的IBA、0.05-0.08mg/L的鏈霉素、15-20g/L的土豆泥、4-8g/L的椰汁；

所述生根培養(yǎng)基包括1/2 B5培養(yǎng)基、0.4-0.8mg/L的CPA、0.02-0.06mg/L的GA₃、0.01-0.05mg/L的NAA、0.2-0.4mg/L的水解乳蛋白、2-6g/L的牛肉汁、7-10g/L的活性炭。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基均滿足以下條件：pH為5.3-5.5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基的pH的調(diào)節(jié)采用緩沖溶液的方式進(jìn)行。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基以及生根培養(yǎng)基均含有6.5-7.0g/L的瓊脂和25-30g/L的蔗糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件為：在光暗交替的情形下進(jìn)行，光照采用白熾燈和藍(lán)光燈同時存在下進(jìn)行，培養(yǎng)時間為10-15天；光暗交替條件為：光照時間為12-14h/天，黑暗時間為10-12h/天，光照強度為1700-1900lux，培養(yǎng)溫度為21-23℃，相對濕度為50-60%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述增殖培養(yǎng)的條件為：在光暗交替的情形下進(jìn)行，光照采用白熾燈和紫光燈同時存在下進(jìn)行，培養(yǎng)時間為15-20天；光暗交替條件為：光照時間為12-14h/天，黑暗時間為10-12h/天，光照強度為2000-2100lux，培養(yǎng)溫度為21-23℃，相對濕度為50-60%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的組織培養(yǎng)方法，其中，所述生根培養(yǎng)的條件為：在光暗交替的情形下進(jìn)行，光照采用自然光，培養(yǎng)時間為7-10天；光暗交替條件為：光照時間為12-14h/天，黑暗時間為10-12h/天，光照強度為2000-2100lux，培養(yǎng)溫度為21-23℃，相對濕度為50-60%。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的組織培養(yǎng)方法，其中，在步驟1）中，所述滅菌消毒具體為：先將所述莖芽置于60-70重量%酒精水溶液中浸泡30-60s，接著將其置于3-5重量%次氯酸鈉水溶液中浸泡3-4min，最后通過蒸餾水進(jìn)行清洗3-5次。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，在步驟1）中，所述外植體的長度為0.4-0.6cm。