[發明專利]一種制備槲皮素-3-D-木糖苷及槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的方法

在審

• 申請號: 201810464120.5
• 申請日: 2018-05-15
• 公開（公告）號: CN108409817A
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 魏蕓;路艷珍
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種用循環聯合正反相高速逆流色譜法從農產品廢棄物蘋果葉75%乙醇?水提取物中分離制備出高純度單體槲皮素?3?D?木糖苷和槲皮素?3?D?阿拉伯糖苷的方法；它是采用循環聯合正反相高速逆流色譜法從蘋果葉75%乙醇?水提取物中分離制備高純度槲皮素?3?D?木糖苷和槲皮素?3?D?阿拉伯糖苷，其溶劑組分由三個組分構成：由乙酸乙酯、甲醇或乙腈或乙醇或正丁醇和水組成；體積比為：10?25：1?4：10?25；其適用于采用各種型號的高速逆流色譜儀分離制備槲皮素?3?D?木糖苷和槲皮素?3?D?阿拉伯糖苷，能直接進大量粗品，槲皮素?3?D?木糖苷和槲皮素?3?D?阿拉伯糖苷分離純度能達到96%以上。該方法操作簡單，成本較低，分離效果好，為農產品中有效成分的分離純化及高附加值利用提供了新的思路。

技術領域

本發明涉及一種采用循環聯合正反相高速逆流色譜法從農產品廢棄物蘋果葉75%乙醇-水提取物中分離制備高純度單體槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的方法。

背景技術

蘋果薔薇科（Rosaceae）蘋果屬（Malus）植物，是目前我國的第一大水果品種，生于海拔50-2500米的平原曠野、黃土丘陵及山坡等處，原產于歐洲和亞洲的中部，在我國甘肅、陜西、山東、河北、遼寧、四川、江蘇、云南、西藏等地廣泛種植栽培，栽培面積近200萬平方千米，栽培面積和產量均占到世界的40%，位居我國首位，是我國少有的占據國際市場競爭優勢的農產品。蘋果葉是薔薇科植物蘋果的葉，蘋果葉性味苦寒，涼血解毒，主治產后血暈，月經不調，發熱、熱毒瘡瓣，燙傷等。每年隨著蘋果的收獲都會產生大量的蘋果落葉，僅陜西省每年就產生約200多萬噸的蘋果樹葉，蘋果葉被有效利用的幾率很低，少量會被當作藥材、飼料、肥料、燃料，其他大部分都直接被當作垃圾處理，造成資源的巨大損失和浪費，同時還會腐爛、變酸、變臭，對環境造成嚴重的污染。研究發現，這些廢棄的蘋果葉中含有大量的多酚類活性成分，如根皮苷、槲皮苷、異槲皮苷、槲皮素-3-D-木糖苷、槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷等，而且顯現出抗氧化、抗菌消炎、抗病毒、抗過敏、護肝、保護心血管、抗癌、抗糖尿病和神經保護效應等生物活性，在新型藥物和天然保健食品開發中具有廣泛的應用前景。因此，從蘋果葉中提取、分離、純化多酚活性成分，探究其生物活性，開發其實際應用，不但可以變廢為寶、提高蘋果的利用效率、實現對農業食品的高值化開發利用，同時還可以減少對環境造成的污染，具有重大的經濟價值和社會效益。本文主要提取蘋果葉中的槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷，他們屬于多酚中的黃酮苷類化合物，具有很強的抗氧化活性。

現有文獻報道分離純化槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的方法主要有大孔樹脂法、制備液相色譜法和高速逆流色譜法等，其中大孔樹脂法分離時間長，操作步驟繁瑣，消耗大量的有機溶劑，很難獲得極高純度的單體，制備液相色譜法存在儀器設備昂貴，一次樣品制備量少等問題，難以用于大量樣品的分離純化，而高速逆流色譜分離制備方法則可以簡單快速廉價的獲得高純度單體。高速逆流色譜是近些年發展起來的一種連續的無需任何固體支持物的高效、快速的液液分配色譜分離技術，它避免了固態支持體或載體帶來的各種問題---樣品易被吸附、損耗和變性，保證較高峰型分辨度，分離量大、樣品無損失、回收率高、分離環境緩和，節約溶劑。高速逆流色譜儀能直接進大量天然產物樣品或合成混合物，分離結果能達到相當高的純度，甚至能直接接質譜儀等儀器，已廣泛應用于生物、醫藥、環保等領域化學物質的制備分離和純化。

本發明建立了循環聯合正反相高速逆流色譜法分離純化蘋果葉75%乙醇-水提取物中槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的方法。該方法操作簡單，簡便易行，且過程溫和，分離效率高，對槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷的分離純化具有實際意義，也為農產品的高附加值利用提供了參考思路。

發明內容

本發明的目的是以75%乙醇-水提取的蘋果葉粗品為原料，通過循環聯合正反相高速逆流色譜的方法分離純化得到槲皮素-3-D-木糖苷和槲皮素-3-D-阿拉伯糖苷單體，純度在96%以上。