[發明專利]一種聯合治療高腫瘤滲透性白蛋白納米系統的制備方法

在審

• 申請號: 201810458211.8
• 申請日: 2018-05-14
• 公開（公告）號: CN108671238A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 李芳;辛俊勃;姜毅;明欣;顧宇晨;陸嘉寅;趙如;陸碩;徐星星;吳寅濤;張冉;莊原;劉軻;夏奇越
• 申請（專利權）人: 江蘇醫藥職業學院
• 主分類號: A61K47/64
• 分類號: A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 周倜

本發明涉及一種聯合治療高腫瘤滲透性白蛋白納米系統的制備方法，包括以下特征步驟：以多功能白蛋白為載體分子，以光療劑的NHS活性酯與白蛋白的氨基按預設量比在pH7.0?8.0緩沖液中反應10?60分鐘；過凝膠柱純化后，按預設量比投入含馬來酰亞胺基團的化療藥物與白蛋白分子的游離巰基避光反應10?60分鐘；過凝膠柱純化后得到同時共價連接光療劑與化療藥物的納米顆粒系統。通過本發明中方法制備的白蛋白納米系統能夠克服現有臨床腫瘤治療中的多藥耐藥問題。

技術領域

本發明涉及生物醫藥遞藥系統制備領域，具體涉及一種聯合治療高腫瘤滲透性白蛋白納米系統的制備方法。

背景技術

癌癥是危害人類健康的惡疾，且發病率逐年上升。盡管在過去的幾十年里，癌癥的治療取得了一些實質性的改善，但是化療藥物耐藥成為阻礙腫瘤有效治療的主要壁壘之一，如伴有惡性胸腔積液的非小細胞肺癌（Non-small Cell Lung Cancer, NSCLC）通常對全身性化療耐藥。

腫瘤多藥耐藥（Multiple Drug Resistance, MDR）是造成腫瘤臨床化療失敗的主要原因，也是腫瘤臨床治療的一大難題。腫瘤耐藥的機制有：攝取的減少、藥物外排、細胞內分布的改變、藥物代謝酶的降解等。智能化納米遞藥系統通過包載藥物能夠延長化療藥物的體內半衰期、改善藥物在腫瘤組織的分布、提高生物利用度，還可控制藥物釋放，實現化療藥物和基因藥物等的共傳遞，有望實現腫瘤的診斷、監測及治療。但是，如何通過機體的物理、生理屏障滲透進入腫瘤組織深處依然是納米遞藥系統發展中亟待解決的問題。

聯合兩種以上的治療手段是克服腫瘤耐藥的一個有效策略，尤其是聯合光動力療法（Photodynamic Therapy, PDT）與化療表現出明顯的殺滅腫瘤細胞的效果。在當前的研究中，許多智能化納米遞藥系統，如載Ce6和阿霉素的PDPA膠束、穿膜肽F3修飾的載PPa與紫杉醇的PEG-PLA納米粒、載阿霉素的NaYF4:Yb/Tm–TiO2納米粒等，通過同時包載光敏劑和化療藥物實現了抗腫瘤耐藥。然而，這些體系的制備工藝復雜、載體材料的生物相容性差等使得它們市場化的前景渺茫。

由于腫瘤組織的一系列物理、生理屏障導致化療藥物很難穿透腫瘤并到達腫瘤組織內部，使腫瘤細胞長時間經受亞致死劑量的藥物刺激，也是腫瘤產生耐藥的重要原因。因此，輸送足夠劑量的藥物至腫瘤內部不僅是減少腫瘤耐藥發生的需要，也是實現抗腫瘤耐藥的關鍵所在。

腫瘤血管生長迅速，形成不成熟、滲漏性比正常血管大、間質液壓升高。納米藥物必須穿過血管壁與組織基質才能到達腫瘤細胞，而只有將足量的藥物傳遞至腫瘤深處才有可能根除腫瘤防止復發。臨床數據已經證實了高滲透長滯留（EPR）效應的存在，即大分子藥物能夠借助EPR效應到達腫瘤并滯留其中不被清除而發揮藥效。與粒徑大的納米藥物相比，粒徑較小的納米藥物能夠更快速的進入腫瘤細胞并更有效的傳遞藥物，這是因為小粒徑的納米藥物的腫瘤穿透性能更好。此外，腫瘤的微環境復雜，存在著一些單靠EPR效應不能克服的屏障，如腫瘤組織的血流量低、血流分布不均、血管通透性的異質性等限制了納米藥物的供給、滲透與分布，而納米藥物必須穿過血管壁與組織基質才能到達腫瘤細胞。

光療能夠增強腫瘤血管的通透性從而提高納米藥物在腫瘤的滲透性。以Pan-IR800預處理荷瘤小鼠后光照，繼而給予納米藥物，結果發現納米藥物的血管滲透性增加了24倍，且對粒徑200nm的納米藥物亦有促滲透的作用。在另一項研究中，以EGFP的抗體-IR700預處理荷瘤小鼠后光照，納米藥物在腫瘤的分布提高了5倍。

因此，為了克服腫瘤多藥耐藥，我們亟待找到切實可行的增加藥劑遞送至實體瘤并達到治療濃度的新方法。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：提出一種聯合治療高腫瘤滲透性白蛋白納米系統的制備方法，該白蛋白納米系統能夠提高藥劑向實體瘤遞送的效率并使藥劑在腫瘤細胞內的濃度達到治療濃度。