[發明專利]健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法

有效

• 申請號: 201810458055.5
• 申請日: 2018-05-14
• 公開（公告）號: CN108918697B
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 林琳;范龍;于旭華;張靖;丘小惠;吳蕾;陳遠彬;梁紫堯
• 申請（專利權）人: 廣東省中醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 佛山幫專知識產權代理事務所(普通合伙) 44387
• 代理人: 顏春艷

本發明涉及藥物分析技術領域，具體公開了健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法。該方法采用液相色譜法進行測定，具體包含如下步驟：供試品溶液制備步驟；色譜條件確定步驟；供試品溶液測定以及毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷含量計算步驟；所述的色譜條件為：色譜柱選用C18色譜柱；檢測波長為250～280nm；流速為0.8～1.5mL/min；進樣體積為10～20μL；以含0.05～0.2體積％磷酸的水為流動性A，乙腈為流動性B，采用梯度洗脫。本發明首次建立了健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法，該方法準確可靠、穩定性及重復性好、檢出限低。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法。

背景技術

慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一種具有氣流阻塞特征的肺部疾病，與慢性支氣管炎和(或)肺氣腫密切相關，可進一步發展為肺心病和呼吸衰竭的常見慢性疾病。慢性阻塞性肺病是一個危害健康的全球性疾病，是我國城鄉居民死亡的第三病因，并且給社會帶來了巨大的經濟負擔。基于此，發明人所在的課題組研究出了健脾益肺方用于治療慢性阻塞性肺病。所述健脾益肺方的重量份原料配比如下：柴胡10～20份，黃芪40～60份，熟黨參40～60份，白術20～30份，燀桃仁10～20份，鎖陽20～30份，廣升麻10～20份，黃荊子20～30份。最優選配方為柴胡16份，黃芪50份，熟黨參50份，白術25份，燀桃仁16份，鎖陽25份，廣升麻16份，黃荊子25份。

但是，健脾益肺方成分復雜，如大規模應用亟需建立內在的質量評估方法，以保證方子效果的穩定可靠。經本課題組研究發現，毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷為健脾益肺方中的2個主要成分，因此，建立健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷含量測定方法有利于控制健脾益肺方的質量。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，提供一種健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法。

本發明所要解決的上述技術問題通過以下技術方案予以實現：

健脾益肺方中毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷的含量測定方法，其采用液相色譜法進行測定，具體包含如下步驟：

供試品溶液制備步驟；

色譜條件確定步驟；

供試品溶液測定以及毛蕊異黃酮和毛蕊異黃酮苷含量計算步驟；

所述的色譜條件為：色譜柱選用C18色譜柱；檢測波長為250～280nm；流速為0.8～1.5mL/min；進樣體積為10～20μL；以含0.05～0.2體積％磷酸的水為流動性A，乙腈為流動性B，采用梯度洗脫；

梯度洗脫包含如下幾個洗脫階段：0～6min，流動性B的體積分數變化為10％～20％；6～17min，流動性B的體積分數變化為20％～20.4％；17～35min，流動性B的體積分數變化為20.4％～40％；35～40min，流動性B的體積分數變化為40％～60％；40～45min，流動性B的體積分數變化為60％～85％。

優選地，色譜柱選用型號為5μm(4.6mm×250mm)的C18色譜柱；檢測波長為260nm；流速為1mL/min；進樣體積為15μL；以含0.1體積％磷酸的水為流動性A，乙腈為流動性B。

優選地，所述的供試品溶液制備步驟的具體方法包含如下步驟：

(1)按如下重量份稱取中藥原料，得健脾益肺方：柴胡10～20份，黃芪40～60份，熟黨參40～60份，白術20～30份，燀桃仁10～20份，鎖陽20～30份，廣升麻10～20份，黃荊子20～30份；