[發(fā)明專利]一種小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的顯色培養(yǎng)基及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810456811.0
• 申請(qǐng)日: 2018-05-14
• 公開（公告）號(hào): CN108374037B
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘國(guó)平;石松;謝俊平;孫霞;陳娟麗;盧新
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東達(dá)元綠洲食品安全科技股份有限公司;廣東中檢達(dá)元檢測(cè)技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12Q1/10;C12R1/01
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 譚英強(qiáng)

本發(fā)明公開了一種小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的顯色培養(yǎng)基及其應(yīng)用，培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨、酵母浸出粉、阿拉伯糖、山梨醇、去氧膽酸鈉、丙酮酸鈉、三號(hào)膽鹽、氯化鈉、五水合硫代硫酸鈉、精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸、七水硫酸鎂、中性紅。該顯色培養(yǎng)基可用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的快速檢測(cè)試劑盒和快速檢測(cè)板的制備。本發(fā)明中提供的顯色培養(yǎng)基及快速檢測(cè)試劑盒、快速檢測(cè)板可實(shí)現(xiàn)不同樣品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的快速檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物檢測(cè)領(lǐng)域，涉及微生物顯色培養(yǎng)基，還涉及用顯色培養(yǎng)基制作的快速檢測(cè)板和檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌是一種革蘭氏陰性桿菌或球菌，廣泛存在于自然界如湖泊、土壤和植被及家禽、家畜和其他動(dòng)物中，并可通過(guò)多種途徑傳播，由小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌引起的臨床癥狀主要表現(xiàn)為急性腹痛、腹瀉、嘔吐等腸胃現(xiàn)象及結(jié)節(jié)性紅斑、關(guān)節(jié)炎、骨髓炎、肝炎敗血癥等并發(fā)癥。

傳統(tǒng)檢測(cè)小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的方法包括增菌培養(yǎng)、理化鑒定、血清分析等一系列復(fù)雜過(guò)程，且這種方法適用于設(shè)備齊全的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中所用，存在檢測(cè)周期長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備材料時(shí)間長(zhǎng)，不能滿足食品安全檢驗(yàn)市場(chǎng)大批量檢驗(yàn)需求。隨著技術(shù)的發(fā)展多種分子生物學(xué)方法也被應(yīng)用到小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌快速檢測(cè)中，比如通過(guò)檢測(cè)相關(guān)基因來(lái)定性分析，或是膠體金免疫法，此類方法檢測(cè)成本高，設(shè)備要求昂貴，并且對(duì)檢測(cè)人員的操作有一定的技術(shù)要求，在食品原材料檢驗(yàn)市場(chǎng)推廣尚有較大難度。

CN105203766A中公開了一種致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌測(cè)試條，將免疫反應(yīng)的特異性、層析方法的快速性及彩色乳膠顆粒作為示蹤物的直觀性等優(yōu)點(diǎn)結(jié)合在一起，有效解決了現(xiàn)有技術(shù)檢測(cè)方法費(fèi)時(shí)、繁瑣、特異性差的問(wèn)題。但是測(cè)試條的制備方法比較復(fù)雜，包括制備純化單克隆抗體、制備活化乳膠顆粒、制備標(biāo)記物、包被硝酸纖維膜、測(cè)試條組裝等步驟，成本較高，對(duì)制作人員有一定的技術(shù)要求，不利于測(cè)試條的大規(guī)模推廣應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的顯色培養(yǎng)基及其快速檢測(cè)板和檢測(cè)試劑盒。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

一種小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的顯色培養(yǎng)基，每1L培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨5～20g、酵母浸出粉1～8g、阿拉伯糖1～10g、山梨醇0.5～5g、去氧膽酸鈉5～20g、丙酮酸鈉0.5～3g、三號(hào)膽鹽2～12g、氯化鈉1～10g、五水合硫代硫酸鈉1～8g、精氨酸1～10g、賴氨酸1～10g、鳥氨酸1～10g、七水硫酸鎂0.01～0.05g、中性紅0.01～0.05g，顯色培養(yǎng)基的pH值為6.8～7.6。

進(jìn)一步地，每1L培養(yǎng)基中含有胰蛋白胨5～20g、酵母浸出粉5～8g、阿拉伯糖5～10g、山梨醇3～5g、去氧膽酸鈉5～10g、丙酮酸鈉1～3g、三號(hào)膽鹽2～8g、氯化鈉1～5g、五水合硫代硫酸鈉2～5g、精氨酸1～5g、賴氨酸1～5g、鳥氨酸1～5g、七水硫酸鎂0.01～0.05g、中性紅0.02～0.05g，顯色培養(yǎng)基的pH值為6.8～7.6。

一種小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的快速檢測(cè)試劑盒，含有選擇性增菌液和本發(fā)明中所述的顯色培養(yǎng)基。

進(jìn)一步地，每1L選擇性增菌液中含有胰蛋白胨1～12g、乳糖5～20g、草酸鈉1～5g、山梨醇0.5～5g、丙酮酸鈉1～5g、氯化鈉1～10g、脫氧膽酸鈉1-5g、抗生素0.15～0.5g，選擇性增菌液pH值為6.8～7.6。

進(jìn)一步地，每1L選擇性增菌液中含有胰蛋白胨6～12g、乳糖15～20g、草酸鈉3～5g、山梨醇3～5g、丙酮酸鈉1～4g、氯化鈉4～6g、脫氧膽酸鈉3～5g、抗生素0.15～0.2g，選擇性增菌液pH值為6.8～7.6。

進(jìn)一步地，抗生素包含頭孢磺啶鈉、頭孢他啶、頭孢唑肟、頭孢哌酮鈉、頭孢曲松鈉、新生霉素和兩性霉素。