[發明專利]一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑

有效

• 申請號: 201810452059.2
• 申請日: 2018-05-12
• 公開（公告）號: CN108713558B
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 袁志輝;何福林;張斌;劉小文;張祖姣;趙子豪;蒲興錨
• 申請（專利權）人: 湖南科技學院
• 主分類號: A01N63/22
• 分類號: A01N63/22;A01N63/20;A01P21/00
• 代理公司: 長沙和雅知識產權代理事務所(普通合伙) 43238
• 代理人: 丁偉

本發明涉及生物技術領域，具體是一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑，由以下重量份的原料組成：地衣芽孢桿菌1.5?3.5份、枯草芽孢桿菌5.6?7.8份、短小芽孢桿菌4.1?6.3份、洋蔥伯克霍爾德氏菌2.5?5.7份及蒸餾水15.0?20.0份。本發明還涉及一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑的制備方法，包括以下步驟：(1)向容器中按配比添加蒸餾水，在室溫下密封一段時間；(2)室溫下，然后依次按配比添加地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌及洋蔥伯克霍爾德氏菌，震蕩均勻，即可。通過本發明的促生制劑，銀杏葉中總黃酮含量由原來的0.85％提升到0.98％左右，極大地提高了經濟價值和藥用價值。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體是一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑。

本發明還涉及一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑的制備方法及應用。

背景技術

銀杏黃酮即銀杏葉提取物，它能夠增加腦血管血液流量，改善腦血管血液循環功能，保護腦細胞，擴張冠狀動脈，預防心絞痛及心肌梗塞，預防血栓形成，提高機體免疫能力，對冠心病、心絞痛、腦動脈硬化、老年性癡呆、高血壓病人均十分有益，具有很高的藥用價值。因此，如何提升銀杏葉中總黃酮含量是我們急需解決的問題。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于克服現有技術的不足，提供了一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑。

為解決以上技術問題，本發明現提出以下技術方案：一種提升銀杏葉中總黃酮含量的促生制劑，由以下重量份的原料組成：地衣芽孢桿菌1.5-3.5份、枯草芽孢桿菌5.6-7.8份、短小芽孢桿菌4.1-6.3份、洋蔥伯克霍爾德氏菌2.5-5.7份及蒸餾水15.0-20.0份。

進一步的，由以下重量份的原料組成：地衣芽孢桿菌2.5份、枯草芽孢桿菌6.6份、短小芽孢桿菌5.2份、洋蔥伯克霍爾德氏菌4.1份及蒸餾水18份。

進一步的，所述地衣芽孢桿菌菌落邊緣不整齊，表面粗糙，呈乳白色；菌體短桿狀，呈堆排列，芽孢中生。該菌用來分離甘草黃酮素，所述地衣芽孢桿菌的制備方法為：8％接種所述地衣芽孢桿菌于液體培養基中，邊加邊攪拌，添加結束后，控制一定的攪拌轉速，好氧培養，保持一定溫度，發酵過程pH值不低于6.5。

進一步的，所述液體培養基成分為：淀粉0.5重量％，尿素0.5重量％，豆粕粉1重量％，磷酸氫二鉀0.6重量％，磷酸二氫鉀0.3重量％，酵母膏0.05重量％，硫酸鎂0.1重量％，硫酸錳0.02重量％。

進一步的，所述枯草芽孢桿菌菌落邊緣整齊，表面光滑，隆起，呈乳白色，菌體短桿狀，呈堆排列，中生芽孢。用于分離甘草黃酮素及類似代謝物，所述枯草芽孢桿菌的制備方法為：包括以下步驟：(1))將枯草芽孢桿菌菌種接種于斜面培養基上，進行斜面培養；(2)斜面培養后的枯草芽孢桿菌接種于種子培養基上，進行種子培養；(3)將經種子培養的種子液接種于發酵培養基上，進行發酵培養，從發酵開始到5～6小時不控制pH值，在5～6小時到8小時之間pH值控制在6.0-6.5之間，8小時后pH控制在7.0-7.5之間至發酵結束，得到枯草芽孢桿菌產品，枯草芽孢桿菌產品中活菌數200-400cfu/ml，芽孢形成率87～92％。

進一步的，所述的斜面培養基包括以下組分：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉10g/L，瓊脂20g/L。

進一步的，所述短小芽孢桿菌菌落邊緣波狀，表面光滑，中凹臺狀，呈乳白色，半透明；菌體細桿狀，柵欄式排列。該菌用來分離甘草黃酮素，所述短小芽孢桿菌的制備方法為：包括以下步驟：(1)菌種活化，短小芽孢桿菌保存菌劃線于平板培養基上，37℃培養24h；(2)菌種發酵培養，將活化后的菌種轉接入10ml種子發酵培養基中，37℃培養48h；(3)將發酵培養好的菌種接種于1000ml三角瓶，37℃培養48h；(4)將在三角瓶培養好的菌種接種于10L種子發酵罐，37℃培養44h，轉速為150r/min，通氣量為0.4vvm。