[發明專利]海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法

在審

• 申請號: 201810448840.2
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108680742A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 徐英江;韓典峰;宮向紅;薛敬林;黃會;羅晶晶;田秀慧;任傳博
• 申請（專利權）人: 山東省海洋資源與環境研究院
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 煙臺智宇知識產權事務所(特殊普通合伙) 37230
• 代理人: 趙文峰

本發明公開了海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法，涉及海洋污染物檢測方法領域，公開了一種海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法，在于使用免疫膠體金法進行測定。實現了首次建立海水和海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的免疫膠體金快速檢測方法，為海水和海洋沉積物中氨基脲污染狀況監測提供技術支持的技術效果。

技術領域

本發明涉及海洋污染物檢測方法領域，尤其涉及海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法。

背景技術

氨基脲是制取硝基呋喃類等藥物的工業原料，也可作為測定酮、醛的試劑、色譜分析及分離激素精油的溶劑。從毒理學角度考慮， 氨基脲具有潛在的弱毒性及致癌性。目前，國內對海洋環境中氨基脲污染狀況的研究發現，通過各種途徑產生的氨基脲最終匯入大海，成為一種新型的環境污染物。因此建立海洋環境中氨基脲定性、定量檢測方法，是評價氨基脲是否會影響海洋環境所必需的。

現有氨基脲檢測方法多為液相色譜串聯質法，對實驗人員和實驗條件要求較高，檢測時間較長，成本較高，檢測所用儀器價格昂貴，不利于海水和海洋沉積物中氨基脲殘留量的簡單、快速的測定。免疫膠體金快速檢測方法是將膠體金免疫技術和層析技術相結合的分析方法，具有快速、簡便、低成本和安全等優點。目前，使用免疫膠體金快速檢測方法對氨基脲進行測定的檢測對象均為水產品，尚無利用免疫膠體金快檢技術開展海水和海洋沉積物中氨基脲殘留量測定方法的研究。

發明內容

本發明的目的是提供一種海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法，首次建立海水和海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的免疫膠體金快速檢測方法，為海水和海洋沉積物中氨基脲污染狀況監測提供技術支持。

為解決上述問題，本發明公開了一種海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法，其特征在于使用免疫膠體金法進行測定。

本發明還公開了海水及海洋沉積物中氨基脲殘留量測定的快速檢測方法，包括如下步驟：

（1）海水樣品用0.45μm纖維濾膜過濾，去除海水中懸浮物，分析時準確量取經過濾的海水20ml于50mL離心管中；海洋沉積物樣品瀝去海水，不需干燥，分析時準確稱取2.0g沉積物樣品于50mL離心管中；

（2）向樣品中加入5mL鹽酸溶液和200μL衍生化試劑溶液，振蕩2min，置于60℃水浴鍋中，孵育30min；

（3）加入5mL磷酸氫二鉀溶液和800μL氫氧化鈉溶液，振蕩1min，再加入10mL乙酸乙酯，振蕩2min，然后置于離心機中4000r/min，離心5min；

（4）準確移取上層液體5mL于15mL離心管中，60℃下吹干；

（5）向吹干的離心管中加入2mL正己烷，振蕩1min，再準確加入500μL復溶試劑，振蕩1min，然后置于離心機中4000r/min，離心1min，取下層溶液待測；

（6）用移液槍移取100μL待測液于免疫膠體金快速檢測卡加樣孔中，室溫反應5min，根據結果判讀示意圖判讀結果。

進一步的，其中所述鹽酸溶液濃度為0.20 mol/L：量取密度為ρ=1.19 g/mL濃鹽酸0.60 mL，用水稀釋至100 mL。

進一步的，其中所述磷酸氫二鉀溶液濃度為0.1mol/L：準確稱取1.74 g磷酸氫二鉀，溶于100 mL水中制成。

進一步的，其中所述氫氧化鈉溶液濃度為1.0 mol/L：準確稱取4.00 g氫氧化鈉，溶于100 mL水中制成。

進一步的，其中所述氨基脲免疫膠體金快速檢測盒，其中含有檢測卡、衍生化試劑和復溶試劑。

進一步的，其中所述電子天平的精度為0.01g。

進一步的，其中所述室溫為20~25℃。