[發明專利]急性紅白血病KEL基因及其轉錄出的環狀RNA分子標記物

有效

• 申請號: 201810448017.1
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108588068B
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發明（設計）人: 金暉;孫漢東;孫志強;伍紫娟;霍海芹;劉文潔;劉延風
• 申請（專利權）人: 金暉
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6886
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 鄭婷

本發明公開了一種急性紅白血病KEL基因及其轉錄出的環狀RNA(circ?KEL)分子標記物以及相關的檢測試劑。與現有技術相比，本發明的檢測試劑具有檢測靈敏度高、特異性強、快速且檢測方法簡單。

技術領域

本發明涉及分子生物學技術領域，具體的涉及一種急性紅白血病KEL基因及其轉錄出的環狀RNA(circ-KEL)分子標記物。

背景技術

急性紅白血病(acute erythroid leukemia，AEL)是一類少見的血液系統惡性疾病，可同時累及多個細胞系，其主要不成熟成分是原始紅細胞。該病可發生于任何年齡組，兒童罕見，在白血病中占2.89％。AEL作為急性髓細胞白血病(acute myeloidleukemia，AML)中的一種少見亞型(M6型AML)，在AML中發病率低于5％。關于該病大宗臨床報道較少，臨床表現各異，且具有較強的異質性。目前，臨床上AEL的治療方案和其他類型AML基本一致，仍以蒽環類藥物聯合阿糖胞苷為主。AEL發病機制不明，且至今未發現相關分子標志物作為診斷標準。

白血病在我國人群中發病率高，近年來其發病率呈上升趨勢，病因至今尚未闡明。目前公認的觀點是白血病是環境-基因相互作用引起的。基因方面涉及代謝、DNA損傷修復基因等的變異。研究發現，致癌物代謝通路中的代謝酶家族在人群中呈多態性，不同個體對特定致癌物的代謝能力有巨大的差異。同樣，DNA修復能力也存在顯著的個體差異。人類基因組計劃研究成果表明，每個人的基因都是一樣的，但在序列上有極小的變異如單核苷酸多態(SNPs)。正是這些基因的SNP多態性導致了基因產物的功能差異，從而決定個體對引起白血病發病的特定致癌物的代謝能力及DNA損傷后修復能力的不同。因此，代謝類基因、DNA修復基因等的多態性是決定人群對白血病易感性的遺傳因素。

白血病患者的遺傳學特征異常復雜多變，包括染色體的易位、缺失、突變和倒位等，這些染色體易位畸變時大部分情況下會產生新的融合基因，這些融合基因可作為診斷不同類型白血病的分子標志，此外，不同類型的白血病化療和放療的治療方案亦不同。因此，融合基因的檢測對白血病的診斷、預后、監測微小殘留病和指導用藥等具有重要的指導價值，已成為白血病診斷標準最重要的指標之一。

現有技術檢測白血病易感人群，采用雜交芯片法或玻璃板芯片法，以及利用taqman探針，該方法準確率低、假陰性和假陽性率較高，且不能批量檢測；另一種直接測序法，雖準確率高，但其成本高、同樣不能實現批量檢測，因此現有方法均無法滿足大規模基因篩選的要求。

環狀RNA(circRNA)是新近確認的一類特殊的非編碼RNA，是RNA剪接后所形成的一類極穩定的保守型產物，circRNA可作為miRNA“海綿”來影響對應靶基因的調控與表達，通過與疾病關聯的miRNA相互作用，在疾病中發揮著重要的調控作用。有研究人員發現circRNA在動脈粥樣硬化、神經系統紊亂、糖尿病和腫瘤等疾病發生過程中發揮著非常重要的作用。目前，已有研究證實circRNA在胃癌和非癌組織的表達量存在顯著差異，是臨床上具有潛在診斷價值的新型生物標志物。迄今為止，KEL基因在AEL中的作用尚無報道，對AEL發病機制的研究仍處于起步階段，國內外還沒有公開任何關于利用KEL基因及其轉錄出的circRNA分子作為急性紅白血病預測和診斷的分子標志物的相關研究報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種急性紅白血病KEL基因及其轉錄出的環狀RNA(circ-KEL)分子標記物，以便于特異性、簡單的對白血病進行檢測。為了實現本發明的目的，擬采用如下技術方案：

本發明一方面涉及一種急性紅白血病KEL基因，其特征在于在急性紅白血病患者的血液樣本中特異性高表達。

本發明另一方面涉及上述急性紅白血病KEL基因所轉錄出的環狀RNA(circ-KEL)分子標記物。

本發明涉及一種檢測試劑，其特征在于該檢測試劑包括如下引物：

KEL-F：5’-GGATCTCCGGGATCATTACCT-3’和