[發(fā)明專利]一種利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810446816.5
• 申請(qǐng)日: 2018-05-11
• 公開（公告）號(hào): CN108588055B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙丹;葛菁萍;平文祥;凌宏志;宋剛;馮永剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N9/24
• 分類號(hào): C12N9/24
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務(wù)所(普通合伙) 23210
• 代理人: 何強(qiáng)

一種利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β?甘露聚糖酶的方法，它涉及涉及一種β?甘露聚糖酶的生產(chǎn)方法。本發(fā)明提供了一種利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β?甘露聚糖酶的方法，該方法與現(xiàn)有技術(shù)相比具有工藝要求低、周期短、生產(chǎn)成本低的優(yōu)勢(shì)。產(chǎn)β?甘露聚糖酶的方法：一、將共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌HDYM?14接種于魔芋粉培養(yǎng)基中；二、發(fā)酵培養(yǎng)、離心，取上清液即獲得β?甘露聚糖酶。本發(fā)明魔芋粉培養(yǎng)基成分簡(jiǎn)單，只有魔芋粉、冰乙酸、硝酸銨和氯化鈉，均為工業(yè)級(jí)原料，成本低廉。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種β-甘露聚糖酶的生產(chǎn)方法。

背景技術(shù)

β-甘露聚糖酶，英文名β-mannanase，特異性水解β-1,4糖苷鍵。β-甘露聚糖酶可將多聚糖降解為低聚糖，低聚糖可作為膳食纖維，促進(jìn)人體腸道中益生菌的生長，進(jìn)而起到促進(jìn)食物消化、維持腸道健康、增強(qiáng)免疫等功效。此外，食品加工領(lǐng)域有極其重要的用途，如果汁澄清和植物中天然活性組分提取。此外，由于β-甘露聚糖酶的主要底物是半纖維素，該酶在纖維性麻類作物的生物脫膠中也有廣泛應(yīng)用，在麻纖維生產(chǎn)的漚麻環(huán)節(jié)中起關(guān)鍵作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶的方法，該方法與現(xiàn)有技術(shù)相比具有工藝要求低、周期短、生產(chǎn)成本低的優(yōu)勢(shì)。

本發(fā)明利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶的方法按以下步驟進(jìn)行：

一、將共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌HDYM-14接種于魔芋粉培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基中初始細(xì)菌HDYM-14濃度為1.5×10⁶～2.5×10⁶個(gè)/mL；

二、在溫度為30～37℃的條件下，發(fā)酵培養(yǎng)40～60h，然后離心，取上清液即獲得β-甘露聚糖酶；

其中，步驟一魔芋粉培養(yǎng)基按1～1.5g魔芋粉、0.3～1mL冰乙酸、0.5g硝酸銨、0.5g氯化鈉和100mL自來水的比例制成。

本發(fā)明中使用的共養(yǎng)生孢菌屬(Syntrophospora sp.)細(xì)菌HDYM-14(于“黑龍江省不同地區(qū)亞麻漚麻液中功能菌生物多樣性的研究”一文中公開，保藏于黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院省高校微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中)為化能異養(yǎng)型細(xì)菌，分離自巴彥縣亞麻溫水漚麻液。

本發(fā)明中共養(yǎng)生孢菌屬(Syntrophospora sp.)細(xì)菌HDYM-14在魔芋粉、冰乙酸、硝酸銨、氯化鈉的底物誘導(dǎo)作用下產(chǎn)生胞外β-甘露聚糖酶。發(fā)酵培養(yǎng)過程中魔芋粉被降解為小分子還原糖，可被細(xì)菌HDYM-14利用；冰乙酸作為小分子羧酸，是共養(yǎng)生孢菌屬(Syntrophospora sp.)細(xì)菌易于利用的碳源；硝酸銨和氯化鈉中的硫酸根、銨根和鈉離子均可被細(xì)菌HDYM-14利用。因此，該發(fā)酵液不但成分簡(jiǎn)單，β-甘露聚糖酶易于分離；并且對(duì)環(huán)境幾乎沒有污染。

本發(fā)明魔芋粉培養(yǎng)基成分簡(jiǎn)單，只有魔芋粉、冰乙酸、硝酸銨和氯化鈉，均為工業(yè)級(jí)原料，成本低廉；而且魔芋粉培養(yǎng)基用水僅為自來水。

本發(fā)明發(fā)酵溫度范圍為30～37℃，溫度參數(shù)寬泛，易于實(shí)現(xiàn)。培養(yǎng)40～60h后上清液中β-甘露聚糖酶活力即可達(dá)到2800～3800U/mL，發(fā)酵周期短，酶活高。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式，還包括各具體實(shí)施方式間的任意組合。

具體實(shí)施方式一：本實(shí)施方式利用共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶的方法按以下步驟進(jìn)行：

一、將共養(yǎng)生孢菌屬細(xì)菌HDYM-14接種于魔芋粉培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基中初始細(xì)菌HDYM-14濃度為1.5×10⁶～2.5×10⁶個(gè)/mL；

二、在溫度為30～37℃的條件下，發(fā)酵培養(yǎng)40～60h，然后離心，取上清液即獲得β-甘露聚糖酶；