[發明專利]ATF3作為靶位點在制備治療鼻咽癌紫杉醇化療增敏藥物中的應用

在審

• 申請號: 201810446380.X
• 申請日: 2018-05-11
• 公開（公告）號: CN108478797A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 曹科;何東;朱煜星;向亮;肖夢卿
• 申請（專利權）人: 中南大學湘雅三醫院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 劉佳芳

本發明公開了ATF3作為靶位點在制備治療鼻咽癌紫杉醇化療增敏藥物中的應用。本發明的研究表明轉錄激活因子3(Activating transfactor 3 ATF3)在鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞中表達水平明顯低于紫杉醇敏感細胞，且ATF3能通過調控HIPPO信號通路增加鼻咽癌的紫杉醇化療敏感性。因此ATF3可能作為鼻咽癌化療增敏治療的潛在靶點。因此，ATF3作為靶位點可以用于制備鼻咽癌的化療增敏治療藥物。尤其是ATF3作為靶位點可以用于制備調控HIPPO通路增加鼻咽癌細胞對紫杉醇化療敏感性的藥物。所述NPC是代指鼻咽癌。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及ATF3作為靶點在制備治療鼻咽癌紫杉醇化療增敏藥物中的應用。

背景技術

鼻咽癌是一類常見于東亞、東南亞及北非地區高度侵襲性的鱗狀細胞癌，除遺傳因素以及環境因素之外，EB病毒在其發病機制中扮演著重要的角色，這也是其不同于其他頭頸部腫瘤之處，鼻咽癌細胞對于放射線的敏感性相對較高且頭頸部的解剖結構極為復雜，因此對于處于早期的鼻咽癌患者，放療是極為有效的首選治療方式。依據最新版的AJCC(American Joint Commission on Cancer AJCC)分期系統，有大約60％～70％的鼻咽癌患者在確診時已處于III期或IV期，單純的使用放療對于晚期階段的鼻咽癌患者預后較差，隨后的一系列研究及臨床數據表明放化綜合治療以及在放療前先使用新輔助化療能有效的提高局部晚期鼻咽癌患者生存率，而紫杉醇則是同步放化療及放療前新輔助化療的一線藥物，但隨著治療的進展部分患者由于獲得性耐藥而導致治療失敗，因此探索鼻咽癌紫杉醇耐藥的分子機制及尋找紫杉醇增敏的方法對于臨床上鼻咽的治療來說是十分重要且有意義的。

長鏈非編碼RNA(long non coding RNA lncRNA)是一類長度大于200個核苷酸的不編碼蛋白或可能夠編碼少量短肽段的轉錄產物。越來越多的證據表明lncRNA可以通過DNA的表觀遺傳學修飾或染色質水平調控轉錄以及轉錄后的調控等一系列機制參與細胞增殖凋亡、自噬、侵襲轉移和放射抵抗等生理病理過程。盡管有部分研究發現lncRNA可參與多藥耐藥調節，但lncRNA調節鼻咽癌紫杉醇化療敏感性的研究十分稀少且具體機制尚不明確。因此，尋找鼻咽癌紫杉醇化療敏感性相關的lncRNA具有十分重要的臨床意義。

發明內容

本研究旨在提供一種可以用于治療鼻咽癌紫杉醇化療增敏的新靶點。在本發明中，我們對鼻咽癌細胞CNE-1紫杉醇耐藥株、HNE-2紫杉醇耐藥株及其相應的親本株進行lncRNA芯片檢測分析并發現了MRVI1-AS1能與轉錄因子ATF3形成正反饋信號環并通過調控HIPPO信號通路來增加鼻咽癌紫杉醇化療敏感性。因此本發明中的發現極有可能成為鼻咽癌紫杉醇增敏的新方法。

我們首先對鼻咽癌紫杉醇耐藥株及親本株行lncRNA芯片篩選，并對芯片結果進行分析發現MRVI1-AS1在耐藥株中的表達水平明顯低于親本株，隨后qRT-PCR確證MRVI1-AS1在鼻咽癌紫杉醇耐藥株中低表達，進一步的細胞實驗驗證MRVI1-AS1的功能，結果顯示，在耐藥株中過表達MRVI1-AS1可以顯著增加鼻咽癌紫杉醇化療敏感性，動物實驗中我們進一步的確證了MRVI1-AS1的功能。

本研究還發現ATF3在鼻咽癌耐藥株中表達水平低于親本株，且MRVI1-AS1能夠通過ceRNA機制同時靶向抑制miR-513a-5p以及miR-27b-3p來上調ATF3的表達水平，進一步的研究發現在鼻咽癌中上調ATF3的表達水平也能夠增加鼻咽癌紫杉醇化療敏感性。

在接下來的研究當中，我們進一步發現ATF3作為轉錄因子可以與MRVI1-AS1的啟動子區域結合從而促進MRVI1-AS1的表達水平，這表明MRVI1-AS1能與ATF3形成一個互相正反饋的調控環。而MRVI1-AS1/ATF3調控環能夠調節HIPPO通路的活性，最后我們發現通過調節HIPPO通路能夠增加鼻咽癌紫杉醇化療敏感性。