[發(fā)明專利]表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810441301.6
• 申請日: 2018-05-10
• 公開（公告）號: CN108607093A
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉翠華;柴琪瑤;汪靜
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;A61P31/04;C07K14/35
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發(fā)明公開了表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明所述的Rv1468c蛋白通過一個在臨床分離的結(jié)核分枝桿菌菌株中保守的UBA結(jié)構(gòu)域直接結(jié)合人體細(xì)胞中的泛素，進(jìn)而能夠促使被感染的人體細(xì)胞對分枝桿菌的選擇性自噬清除。本發(fā)明所述的Rv1468c蛋白及所包含的UBA結(jié)構(gòu)域可成為抗結(jié)核分枝桿菌藥物的新靶點，并可通過介質(zhì)遞送到病原菌表面為抗感染治療藥物的開發(fā)提供指導(dǎo)，同時能夠為設(shè)計、發(fā)展新型抗結(jié)核疫苗或相關(guān)藥品提供參考。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)

結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)是結(jié)核病(Tuberculosis)的病原體。目前，全球有三分之一的人感染結(jié)核病，且每年因結(jié)核病死亡的人數(shù)高達(dá)百萬。為此，結(jié)核病與艾滋病、瘧疾并稱為當(dāng)今世界威脅人類健康的三大傳染病。

自噬(autophagy)是機(jī)體的一種重要的免疫防御機(jī)制。包括結(jié)核分枝桿菌在內(nèi)的多種細(xì)胞內(nèi)寄生病原菌侵入宿主細(xì)胞后，細(xì)胞將激活自噬信號通路，進(jìn)而將侵入胞內(nèi)的病原菌表面標(biāo)記上泛素。隨后，自噬受體p62、NDP52、NBR1及OPTN等能夠識別并結(jié)合到被泛素標(biāo)記的病原菌上，同時進(jìn)一步招募和結(jié)合自噬體標(biāo)志物L(fēng)C3，從而引發(fā)自噬體(autophagosome)對細(xì)胞質(zhì)中病原菌的捕獲。隨后，自噬體將進(jìn)一步成熟并與溶酶體(lysosome)融合，最終將病原菌降解清除。然而在上述自噬過程中，泛素對病原菌的何種表面蛋白能夠進(jìn)行識別和靶向作用在之前尚無報道。

Rv1468c又稱PE_PGRS29，是定位在分枝桿菌細(xì)胞表面的一類蛋白，屬于分枝桿菌PE_PGRS蛋白家族。分枝桿菌PE_PGRS蛋白家族已鑒定有61個成員，且主要在致病性的分枝桿菌中表達(dá)，包括結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis)、海分枝桿菌(Mycobacterium marinum)等。PE_PGRS家族的蛋白大多分布在分枝桿菌表面，因此在分枝桿菌與宿主細(xì)胞相互作用中起到了重要作用，且該蛋白家族成員大多都具有不同的調(diào)控宿主免疫功能的機(jī)制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個目的是提供一種表面蛋白Rv1468c在免疫調(diào)節(jié)方面的應(yīng)用。所述表面蛋白Rv1468c蛋白的序列如SEQ ID NO:1所示。該蛋白存在一個可與泛素結(jié)合的UBA功能域，該UBA功能域的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通過該UBA功能域，Rv1468c受到細(xì)胞內(nèi)泛素的直接靶定和結(jié)合，進(jìn)而引發(fā)如前所述的機(jī)體細(xì)胞對病原菌的選擇性自噬信號通路，從而清除侵入細(xì)胞內(nèi)的病原菌。此外，Rv1468c蛋白的第64位和第65位氨基酸組成了UBA功能域中關(guān)鍵的“VL”模序，該模序提供了一個疏水氨基酸簇，幫助Rv1468c蛋白與泛素通過疏水相互作用結(jié)合到一起。因此，本發(fā)明的Rv1468c蛋白的發(fā)現(xiàn)能夠促進(jìn)發(fā)展更加高效的抗感染藥品或新疫苗，并為靶向宿主提高機(jī)體免疫力的治療方法提供參考。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述在免疫調(diào)節(jié)方面應(yīng)用包括抑制或清除病原菌。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述蛋白Rv1468c含有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述病原菌具有保守的結(jié)合泛素(ubiquitin)的UBA功能域；所述UBA功能域的氨基酸序列包括如以下(a)或(b)或(c)所示：

(a)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；

(b)在(a)中的氨基酸序列經(jīng)過取代、缺失或添加部分氨基酸且具有結(jié)合泛素活性的由(a)衍生的多肽或其類似物；

(c)與(a)、(b)中氨基酸序列整體相似度在85％以上的由(a)衍生的多肽或類似物。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述病原菌為分枝桿菌。