[發(fā)明專利]異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因作為篩選標記基因在培育轉(zhuǎn)基因擬南芥植株中的應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810440441.1 | 申請日: | 2018-05-09 |
| 公開(公告)號: | CN108588115A | 公開(公告)日: | 2018-09-28 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 翟立紅;騰峰;杜鄧襄;孫偉;韓鵬;肖娟 | 申請(專利權(quán))人: | 湖北文理學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N15/82 | 分類號: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;C12N15/65;C12N15/54 |
| 代理公司: | 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 楊靜安 |
| 地址: | 441000 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 異戊烯轉(zhuǎn)移酶 擬南芥 篩選 篩選標記基因 基因 培育轉(zhuǎn)基因 植株 植物基因工程技術(shù) 應(yīng)用 篩選標記 遺傳轉(zhuǎn)化 可視化 轉(zhuǎn)基因 | ||
1.異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因作為篩選標記基因在培育轉(zhuǎn)基因擬南芥植株中的應(yīng)用,其特征在于,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因編碼異戊烯基轉(zhuǎn)移酶,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因的堿基序列如SEQID NO.2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于,所述應(yīng)用包括:
將經(jīng)農(nóng)桿菌侵染后的外植體置于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行組織培養(yǎng),以誘導(dǎo)出愈傷組織且分化出芽;所述外植體為擬南芥的根;
選取并培養(yǎng)所述芽,得到轉(zhuǎn)基因擬南芥植株;
其中,所述農(nóng)桿菌含有載體,所述載體含有第一篩選標記基因,所述第一篩選標記基因為所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基含有:4-5g/LMS、19-21g/L葡萄糖、0.4-0.6mg/L 2,4-D以及0.04-0.06mg/L KT。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述載體還含有第二篩選標記基因,所述第二篩選標記基因為EGFP基因。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述載體的骨架為pEGAD載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述第一篩選標記基因插入在所述pEGAD載體的EcoRⅠ和HindⅢ兩個酶切位點之間。
8.一種用于培育轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的載體,其特征在于,該載體含有篩選標記基因,所述載體為異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因編碼異戊烯基轉(zhuǎn)移酶,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶的氨基酸序列如SEQID NO.1所示。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的載體,其特征在于,所述異戊烯轉(zhuǎn)移酶基因的堿基序列如SEQID NO.2所示。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的載體,其特征在于,所述載體還含有EGFP基因。
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