[發明專利]亞硝化菌的保藏方法

有效

• 申請號: 201810436739.5
• 申請日: 2018-05-09
• 公開（公告）號: CN108486019B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: 湯江武;孫宏;李園成;吳逸飛;姚曉紅;王新;沈琦
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 楊樂

1.亞硝化菌的保藏方法，其特征在于包括以下步驟：

1)配置保護劑：在100～110份無菌水、2.8～3.5份谷氨酸鈉、20～22份磷酸三鉀和2份半胱氨酸，混合均勻得到保護劑；

2)加入菌體：在步驟1)得到的保護劑中加入0.8～1.2倍體積亞硝化菌菌體，震蕩重懸，得到混合液；

3)冷熱脅迫處理：將得到的混合液于30～40℃恒溫熱處理10～20min，然后于4～8℃恒溫處理1～2h；

3)冷凍保藏：將步驟2)得到的混合液冷凍干燥，于-70～-90℃下冷凍保藏，每隔2～3個月進行活化轉接。

2.根據權利要求1所述的亞硝化菌的保藏方法，其特征在于，所述的冷凍干燥工藝為：預凍：-40～-30℃預凍3～5h；冷凍干燥：-70～-60℃，30～50Pa冷凍干燥5～7h，-20～-10℃，60～100Pa冷凍干燥2～3h；升華干燥：5～15℃，100～200Pa升華干燥3～4h；解析干燥:10～20℃，3～5Pa解析干燥2～4h。