[發明專利]一種囊孔附毛菌的馴化方法及馴化的囊孔附毛菌和應用

有效

• 申請號: 201810433512.5
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108611279B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 王立安;姚瀾;趙立強;張金秀
• 申請（專利權）人: 河北師范大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/36;A61K36/07;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發明提供了一種囊孔附毛菌的馴化栽培方法，屬于菌物的人工馴化技術領域。本發明的馴化栽培方法，包括以下步驟：1)野生囊孔附毛菌子實體的分離培養，得母種菌絲體；2)母種菌絲體進行母種擴繁培養，得擴繁母種；3)擴繁母種菌塊進行原種培養，得原種；4)原種進行栽培種培養，得栽培種；5)栽培種進行馴化栽培培養，菌絲生長速度快，菌絲長勢好、濃密；14～17d原基發生，7～10d形成小子實體，10～15d長成正常子實體，子實體產量高。人工栽培獲得的孔附毛菌子實體無毒，其子實體多糖具有明顯的體外抗肝癌活性。

技術領域

本發明屬于菌物的人工馴化技術領域，具體涉及一種囊孔附毛菌的馴化方法及馴化的囊孔附毛菌和應用。

背景技術

我國地域幅員遼闊，菌物資源豐富，野生菌達3700多種。野生菌中很多種類香味獨特、味道鮮美，體內含有蛋白質、多糖、不飽和脂肪酸、礦質元素、維生素等多種營養成分，還有不少具有藥用價值，如抗腫瘤、抗炎、抗病毒、保護肝臟、增強免疫力、降血糖、抗胃潰瘍、防衰抗老、預防和治療關節炎等多種藥理活性。囊孔附毛菌(Trichaptum biforme)是擔子菌門異擔子菌綱非褶菌目多孔菌科附毛菌屬的一個種，該真菌生于闊葉樹上，如樺、楊、柳、櫟等。稀生于針葉樹上，木材白色腐朽。在中國、越南、馬來西亞、印度尼西亞、芬蘭、美國等國家均有發現。該菌擔子果一年生，無柄，韌革質。菌蓋半圓形到扇形，單生或覆瓦狀排列并左右相連，直徑1～3cm，表面具放射狀的粗毛，近白色，灰白色，具有淺土黃色有淺土褐色相間的環紋，具有細長絨毛或絨毛；邊緣薄而銳，完整或瓣裂，波浪狀，稍內卷。菌肉近白色或木材色，厚1～3mm。菌管與菌肉同色或色稍深，長2～7mm。孔面淺褐色或堇紫色；管口不規則形，往往裂成齒狀，高低不平，每毫米0.5～2個。菌絲系統二體型；生殖菌絲透明，薄壁，具鎖狀聯合，直徑3～4μm；骨架菌絲淡黃色，厚壁，少分枝，直徑4～5μm。囊狀體多，無色，稍厚壁，紡錘狀，被結晶，突出子實層12～15×5～6μm。目前圍繞囊孔附毛菌的研究主要在發酵產物活性上，且數量不多，未見任何囊孔附毛菌馴化栽培技術的報道，所以其一直被視為野生種質資源，無栽培馴化種。

發明內容

本發明的目的在于提供一種囊孔附毛菌的馴化栽培方法，將野生囊孔附毛菌馴化為可供人工培養且具有高子實體得率的菌種。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種囊孔附毛菌的馴化栽培方法，包括以下步驟：

1)取野生囊孔附毛菌的子實體在PDA培養基上分離培養10～11d，得母種菌絲體；

2)將步驟1)得到的所述母種菌絲體在母種培養基上進行7～8d的擴繁培養，得擴繁母種；所述母種培養基包括：木屑25～75g/L(煮汁)，麩皮25～75 g/L(煮汁)，馬鈴薯切片150～250g/L(煮汁)，葡萄糖18～25g/L，蛋白胨2～4 g/L，無水硫酸鎂2～4g/L，磷酸二氫鉀1～2g/L，瓊脂18～22g/L；

3)取步驟2)得到的所述擴繁母種的菌塊在原種培養基上進行17～23d 的原種培養，得原種；所述原種培養基包括以下重量百分比的原料：95～99％的高粱和1～5％的石膏；

4)將步驟3)得到的所述原種在栽培種培養基上擴大培養25～30d，得栽培種；所述栽培種培養基包括以下重量百分比的原料：75～80％的木屑，15～25％的麩皮，0.5～2％的葡萄糖和0.5～2％的石膏；

5)將步驟4)得到的所述栽培種在栽培料上進行30～40d的馴化培養，得馴化的囊孔附毛菌，所述栽培料包括以下重量百分比的原料：75～80％的棉籽殼，15～25％的麩皮，0.5～2％的葡萄糖和0.5～2％的石膏。

優選的，步驟1)所述分離培養的條件包括：15～25℃的培養溫度下進行暗培養。

優選的，步驟2)所述擴繁母種培養的條件包括：培養溫度為22～28℃。