[發明專利]一種生物技術產品DNA含量估計方法有效
| 申請號: | 201810431446.8 | 申請日: | 2018-05-08 |
| 公開(公告)號: | CN108830046B | 公開(公告)日: | 2021-09-17 |
| 發明(設計)人: | 李亮;金蕪軍;宛煜嵩;劉衛曉;蘭青闊;溫洪濤;柳方方 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院生物技術研究所 |
| 主分類號: | G16B25/20 | 分類號: | G16B25/20;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙) 11548 | 代理人: | 李靜 |
| 地址: | 100044 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 生物技術 產品 dna 含量 估計 方法 | ||
1.一種生物技術產品DNA含量估計方法,其特征在于,按照如下步驟進行:
(1)實時熒光定量PCR或數字PCR的樣品中DNA樣品相對百分含量從以下公式得到:
所述X為檢測外源基因拷貝數;所述Y為檢測內標準基因拷貝數;
(2)X和Y為隨機變量,根據以下展開公式計算兩變量比值的平均值及標準偏差;
(3)μX和μY分別用外源基因和內標準基因重復平均數的估算值來評價,Var[X]和Var[Y]也用重復數據的誤差來評價;假定X和Y間的互作誤差忽略不計;單次檢測的相對誤差通過下面公式計算:
(4)多次重復實驗,這里用n表示重復的次數;則n次重復均值的近似均數和誤差為:
N個重復樣品的相對標準偏差則可以用(5)和(6)來計算:
2.根據權利要求1所述的一種生物技術產品DNA含量估計方法,其特征在于,所述估計方法需要的外源基因拷貝數檢測與內標準基因拷貝數檢測是獨立進行。
3.根據權利要求1所述的一種生物技術產品DNA含量估計方法,其特征在于,對于多次重復實驗,需計算外源基因拷貝數與內標準基因拷貝數的重復平均數μX和μY以及重復數據的誤差來評價Var[X]和Var[Y],隨后進行兩個變量比值的均值和誤差計算。
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