[發(fā)明專(zhuān)利]一種青天葵球莖組織培養(yǎng)快速繁殖方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810430180.5
• 申請(qǐng)日: 2018-05-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108522284A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 袁萍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 佛山市元諾科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種青天葵球莖組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：(1)外植體的取材與消毒；(2)無(wú)菌根狀莖的獲取；(3)根狀莖繁殖及球莖誘導(dǎo)一體化培養(yǎng)；(4)球莖煉苗移栽。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明技術(shù)方案的有益效果是：本發(fā)明通過(guò)生物技術(shù)對(duì)青天葵球莖進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖，在短時(shí)間內(nèi)培育出大量可供大田栽培的青天葵種苗，顯著提高了青天葵種苗的繁殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，滿足生產(chǎn)上的需要。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種青天葵球莖組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)

青天葵為蘭科植物毛唇芋蘭Nerviliafordii(Hance)Schitr的葉或帶球莖的葉，又名獨(dú)葉蓮、獨(dú)腳蓮、珍珠葉、墜千斤、鐵帽子、山米子、青蓮。性平，味苦，甘、涼。青天葵是我國(guó)珍稀瀕危植物，有清肺止咳，健脾消積，清熱解毒，消結(jié)散疬等功效，主治肺癆咯血，肺熱咳嗽，小兒肺炎，急性喉炎，口腔炎，咽喉腫痛，瘰疬，瘡瘍腫毒，跌打損傷等。青天葵主要以球莖進(jìn)行繁殖，但繁殖系數(shù)極低，加之多年來(lái)人們滅絕式的挖掘，導(dǎo)致野生青天葵資源日益枯竭。然而，國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的需求量卻逐年加大，青天葵已遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了市場(chǎng)的需求。

通過(guò)栽培試驗(yàn)比較，發(fā)現(xiàn)青天葵組培球莖不僅能正常生長(zhǎng)，而且在相同條件下栽培組培球莖優(yōu)于野生球莖。因此，如何利用現(xiàn)代生物技術(shù)通過(guò)優(yōu)化青天葵組織培養(yǎng)條件，為青天葵組織培養(yǎng)規(guī)模化生產(chǎn)育苗提供技術(shù)支撐，從而更好的開(kāi)發(fā)和利用青天葵藥用植物資源。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種青天葵球莖組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的，采取以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

一種青天葵球莖組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：

(1)外植體的取材與消毒：青天葵球莖作為外植體進(jìn)行消毒，首先將3-5滴洗潔精滴入裝有50ml自來(lái)水的燒杯中，把外植體放入燒杯輕輕攪拌5min，再用棉花清洗外植體表面污垢，自來(lái)水輕微流水沖洗20-30min；移置超凈工作臺(tái)，用75v/v％乙醇浸泡30s，無(wú)菌水沖洗一遍，然后再用添加了1-2滴吐溫-20的50ml濃度為0.1v/v％升汞消毒1-2min、無(wú)菌水沖洗3-5次，獲得無(wú)菌外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高高溫壓滅菌的蒸餾水；

(2)無(wú)菌根狀莖的獲取：將消毒好的外植體置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)，發(fā)芽得到無(wú)菌根狀莖，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加5g·L^-1瓊脂，20g·L-1蔗糖，1.5mg·L-1的6-芐基腺嘌呤，0.3mg·L-1的萘乙酸，培養(yǎng)基pH值為6.8，培養(yǎng)條件為：溫度為25-27℃，光照強(qiáng)度1500-2000lux，光照時(shí)間為10-12h/d，培養(yǎng)時(shí)間為15-20d；

(3)根狀莖繁殖及球莖誘導(dǎo)一體化培養(yǎng)：切取2-3cm的無(wú)菌根狀莖置于添加5g·L-1瓊脂，25g·L-1蔗糖，1.0-2.0mg·L-1的6-芐基腺嘌呤、0.1-0.5mg·L-1的激動(dòng)素(KT)、0.1-0.5mg·L-1的萘乙酸、梨汁100-200g·L-1的1/2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得球莖，培養(yǎng)基pH值為6.8，培養(yǎng)條件為：溫度為25-27℃，光照強(qiáng)度1500-2000lux，光照時(shí)間為10-12h/d，培養(yǎng)時(shí)間為20d；

(4)球莖煉苗移栽：球莖進(jìn)行煉苗后移植于基質(zhì)中培養(yǎng)，先移栽至大棚7天，再移栽至大田。

優(yōu)選的，步驟(4)中的煉苗移栽按以下操作進(jìn)行：經(jīng)過(guò)步驟(3)獲得球莖，在室溫為20℃的室內(nèi)進(jìn)行煉苗，并在瓶中加水淹沒(méi)培養(yǎng)基，煉苗5-7d，取出球莖，洗凈培養(yǎng)基，再放入ABT生根粉配成100mg/·L-1的溶液中浸泡30min,浸泡后移栽到基質(zhì)中生長(zhǎng)30-40d，再移栽至大田。

優(yōu)選的，所述基質(zhì)為按優(yōu)質(zhì)塘泥：黃沙＝2：1的比例混合。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明技術(shù)方案的有益效果是：