[發(fā)明專利]一種快速判定煙草種子采收時間的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810430070.9
• 申請日: 2018-05-08
• 公開（公告）號: CN108841917B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 牛永志;鄭昀曄;馬文廣;古吉
• 申請（專利權(quán)）人: 玉溪中煙種子有限責(zé)任公司;云南省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號: C12Q1/26
• 分類號: C12Q1/26
• 代理公司: 昆明知道專利事務(wù)所(特殊普通合伙企業(yè)) 53116
• 代理人: 姜開俠;姜開遠(yuǎn)

本發(fā)明提供了一種快速判定煙草種子采收時間的方法。本發(fā)明提供的方法包括種子剝?nèi)　⒋置敢禾崛　⒖傔^氧化物歧化酶活性測定和判定等步驟。當(dāng)總過氧化物歧化酶的測定值低于極限數(shù)值時，則判定可以進(jìn)行采收，YY?87和MSK?326種子中總過氧化物歧化酶的極限數(shù)值分別為75U/mg prot和90U/mg prot。本發(fā)明提供的方法條件選擇合理，檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，耗時短，能夠在半天內(nèi)完成所有檢測步驟。彌補了現(xiàn)有的通過萌發(fā)率來判斷煙草種子采收時間的方法所需時間過長的缺點，滿足了煙草生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于種子繁殖生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種快速判定煙草種子采收時間的方法。

背景技術(shù)

種子活力是判斷種子質(zhì)量的一個重要指標(biāo)。高活力種子具有明顯的生長優(yōu)勢和生產(chǎn)潛力，對提高種子耐藏性和田間成苗率、抵抗苗期逆境、節(jié)省播種量、增加產(chǎn)量具有重要意義。目前大量研究證明，種子的萌發(fā)率、活力指數(shù)等生理指標(biāo)可以反映種子萌發(fā)速度、幼苗發(fā)育潛力和植株品質(zhì)，能夠成為判定種子活力高低的可信指標(biāo)。種子萌發(fā)試驗法比較直觀、指標(biāo)明確，但通常一次試驗需要7-14天，耗時長、操作繁瑣。由于在生化、分子方面的成熟機理尚未開展深入研究，缺乏煙草種子活力的內(nèi)在評價指標(biāo)，在實際生產(chǎn)中，煙草種子的活力仍然主要依靠萌發(fā)率來判斷。

煙草種子的活力決定了煙草種子的采收時間。目前，在實際種子繁殖生產(chǎn)中，主要依據(jù)蒴果和種子顏色進(jìn)行經(jīng)驗判斷采收時間，這種方式無法準(zhǔn)確反映種子的真實活力情況。在成熟過程中萌發(fā)率隨時間變化非常快，盡管種子采收后可通過測定種子萌發(fā)率評價種子活力情況，然而這一檢測過程需要耗時太長，無法實現(xiàn)及時判定采收時間。因此，需要建立一種可以快速測定種子活力，進(jìn)而判定采收時間的方法。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，我們對煙草種子成熟過程中種子活力同其內(nèi)含物、酶活水平等進(jìn)行了深入研究。研究表明：煙草種子在成熟過程中，種子中總超氧化物歧化酶水平同其活力有很強的相關(guān)性。據(jù)此，我們可以通過快速測定煙草種子成熟過程中的總超氧化物歧化酶的水平，評價種子的活力，進(jìn)而判斷種子的適宜采收時間。這一發(fā)明，可以將煙草種子活力判定縮短到半天的時間內(nèi)，可以實際解決如何準(zhǔn)確快速判定煙草種子采收時間的問題。

為實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種快速判定煙草種子采收時間的方法，包括以下步驟：

（1）種子剝?nèi)。翰烧茻?7和MSK-326蒴果，人工剝?nèi)》N子；

（2）粗酶液提取：取大約0.1g種子于2ml離心管中，并加入0.9ml提取液，置于全自動樣品快速研磨儀中研磨至勻漿，勻漿經(jīng)過離心后取上清液用于抗氧化酶測試；

（3）總過氧化物歧化酶活性測定：采用羥胺法測定；

（4）判定：當(dāng)總過氧化物歧化酶的測定值低于極限數(shù)值時，則判定可以進(jìn)行采收，YY-87和MSK-326種子中總過氧化物歧化酶的極限數(shù)值分別為75U/mg prot和90U/mg prot。

步驟（2）中，所述的提取液為50mM磷酸鹽緩沖液，PH=7.4，離心條件為5000g，10分鐘。

附圖說明：

圖1：不同成熟時期云煙87和MSK-326的種子萌發(fā)率；

圖2：不同成熟時期云煙87和MSK-326的種子總過氧化物歧化酶的活性；

圖3：煙草種子萌發(fā)率和總過氧化物歧化酶活性的相關(guān)性分析。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但不以任何方式對本發(fā)明加以限制，基于本發(fā)明教導(dǎo)所作的任何變換或替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

本發(fā)明提供了一種快速判定煙草種子采收時間的方法，包括以下步驟：