[發明專利]超靈敏高選擇性檢測次氯酸的比色熒光探針的制備方法

在審

• 申請號: 201810428744.1
• 申請日: 2018-05-07
• 公開（公告）號: CN108530462A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 銀川高新區廣煜科技有限公司
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10;C09K11/06;G01N21/64
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及快速高靈敏高選擇性識別次氯酸的熒光探針的制備方法。具體地，本發明方法所制備的探針為一類熒光素類化合物，其可作為次氯酸熒光探針用于次氯酸的檢測。這類探針可實現如下的技術效果中的至少一個：高靈敏高選擇性地識別次氯酸并進行準確檢測；可以快速對次氯酸實現響應；可以實現對次氯酸的即時檢測；性質穩定，可以長期保存使用；有利于在實際樣本中對(體內/體外)次氯酸進行檢測。

技術領域

本發明涉及熒光素類化合物作為次氯酸熒光探針，其可在純水體系下對細胞內源性次氯酸進行快速超靈敏高選擇性檢測，或者其可測定實際水樣中次氯酸的濃度。

背景技術

在人體內，次氯酸(HClO)可以以髓過氧化物酶(MPO)催化反應的過氧化氫和氯離子的調節方式產生，其與先天宿主防御和對殺死各種病原體非常重要。在體外，由于泳池水次氯酸濃度過高導致的游泳池中毒事件現依舊頻頻發生。生物體內產生或蓄積過量的次氯酸，會引起多種疾病，包括心血管疾病，動脈粥樣硬化，骨關節炎，類風濕性關節炎和肺損傷，嚴重還會導致癌癥。因此，檢測實際水體和生物體系中次氯酸的濃度已成為一個重要的課題，現亟待發展快速、靈敏、高選擇性檢測次氯酸的手段。

當前，常見的次氯酸檢測手段主要是碘還原滴定法、分光光度法、化學發光分析法、庫倫法等。但這些分析手段在實際應用中既昂貴又繁瑣，且常常需要特殊的昂貴實驗儀器和高技能專業操作人員。因此，高效、廉價、簡捷的次氯酸檢測手段成為重要的研究課題。

在各種離子/分子的檢測方法中，比色熒光探針檢測法由于操作簡單，可在現場使用，選擇性和靈敏度高，檢測范圍廣，響應時間快速，能夠進行原位檢測和實時監測，檢測過程對樣品沒有破壞而極為引人注目。但是目前報道的熒光探針仍存在一些問題，包括靈敏度低、選擇性差以及合成復雜等。總之，發展具有高靈敏度、高選擇性、合成步驟簡單的次氯酸比色熒光探針是本領域技術人員急需解決的問題。

發明內容

本領域急需一種制備簡單的快速高靈敏高選擇性識別次氯酸的比色熒光探針，從而能夠有效檢測體內或體外次氯酸。為此，本發明合成了一類新穎的次氯酸的熒光探針，其合成簡單、超靈敏、穩定性高、和/或選擇性高，和/或能夠快速特異性識別次氯酸。

具體而言，本發明提供了一種次氯酸比色熒光探針，其為熒光素類化合物，其結構如下：

優選的，本發明的熒光探針是：

在本發明的次氯酸熒光探針的制備方法中，第一步反應溫度是70℃油浴；反應時間是24h，和/或間苯二酚和4-乙氨基酮酸的摩爾比約為1:1至1：1.2，優選的為1：1；第二步反應溫度為常溫，和/或第一步的產物與二甲氨基硫代甲酰氯的摩爾比為約1：4至1：12，優選為1：10或1：12。

本發明還提供了用于檢測樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的檢測制劑或試劑盒，其包含本發明的探針。優選地，本發明的檢測制劑或試劑盒還包含產品的使用說明書。還優選地，本發明的試劑盒還包含用于測定樣本中的次氯酸濃度的緩沖劑。

本發明還提供了檢測樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的方法，其包括將本發明的探針與待測樣本接觸的步驟。

本發明還提供了本發明的探針在制備用于檢測樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的制劑中的用途。

本發明還提供了本發明的探針在制備用于檢測樣本(例如游泳池水樣本)中次氯酸濃度的試劑盒中的用途。

本發明的次氯酸熒光探針可與次氯酸進行特異性作用，產生熒光光譜的變化，從而實現對次氯酸的定量檢測。

具體而言，本發明的次氯酸熒光探針分別與過氧化氫、過氧化亞硝酸鹽、氯酸鹽以及其他物質進行作用均不能導致熒光光譜的明顯改變，從而實現對次氯酸的特異性識別。