[發明專利]用于鼻咽癌診斷的標志物

有效

• 申請號: 201810424633.3
• 申請日: 2018-05-07
• 公開（公告）號: CN108707665B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 羅微;王躍建;金亞彬;張國義;林凱容;崔金環;陳湘萍;潘英明
• 申請（專利權）人: 佛山市第一人民醫院（中山大學附屬佛山醫院）
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝

本發明公開了一種用于鼻咽癌診斷的標志物，該組標志物包括TCRBV5.4、TCRBV6.3、TCRBV6.4、TCRBV6.6、TCRBV6.7、TCRBV7.9、TCRBV8.1、TCRBV10.2、TCRBV10.3、TCRBV12.3、TCRBV12.4、TCRBV15、TCRBV20.1、TCRBV22、TCRBV25.1，并通過LASSO模型構建了鼻咽癌診斷公式，得到了根據這些TCR基因預測鼻咽癌的方法，經過ROC檢測，診斷公式在測試組中的AUC值達到0.96，當靈敏度為0.95時，特異性為0.86；在驗證組中的AUC值為0.74，當靈敏度為0.79時，特異性為0.75，診斷效能良好。

技術領域

本發明涉及一種用于鼻咽癌診斷的標志物。

背景技術

鼻咽癌目前屬于一種治愈率較高的疾病，關鍵在于早期診斷、及時治療。因此，鼻咽癌的篩查和診斷尤為重要。然而由于鼻咽部解剖位置隱蔽，鼻咽癌早期癥狀不明顯，給鼻咽癌早期診斷帶來了一定困難。

目前鼻咽癌的主要輔助檢查手段有電子鼻咽鏡、鼻咽CT及EB病毒血清學檢查等。電子鼻咽鏡照明度強，圖像清晰，可動態觀察鼻咽全貌，能夠發現鼻咽部微小隱蔽的病變，但是由于電子鼻咽鏡不能發現粘膜下病變，故也存在一些假陰性。CT圖像分辨率極高，較為經濟實用，技能分辨骨質，也能分辨軟組織，設備比較普及，是目前鼻咽癌診斷中常用的方法，但是，由于部分容積效應的影響，CT對于咽隱窩等隱蔽部位體積較小的早期病灶，尤其在等密度病灶時往往很難發現，同時，局部的驗證、分泌物和淋巴組織是的在CT上判斷鼻咽癌部的對稱性變得困難。研究表明EB病毒與鼻咽癌的發生發展緊密相關，EB病毒血清學檢查作為目前鼻咽癌診斷的輔助指標，在鼻咽癌上具有一定的指導意義，但是該方法存在一定的假陽性，不僅增加了臨床的工作量，也給受檢者帶來不必要的壓力。鼻咽癌診斷仍主要依賴于活檢手術樣本的病理診斷，亟需獲得其他可有效輔助于鼻咽癌診斷的特異分子指標。

機體免疫系統識別和清除腫瘤細胞主要依賴于T細胞介導的細胞免疫。T細胞受體(TCR)是T細胞表面特異性識別抗原和介導免疫應答的分子，是人類基因組中多態性最高的區域之一，決定著人的免疫系統如何適應環境的變化。T細胞受體庫的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達)直接反映了機體免疫應答的狀態。

TCR可分為TCRα/β和TCRγ/δ兩種類型，人類外周血T細胞主要為TCRα/β的T細胞，是介導機體特異性細胞免疫反應的主要細胞。TCRβ基因由可變區(V)、多變區(D)、結合區(J)和恒定區(C)四部分基因片段組成，形成互補決定區(complementarities determiningregion,CDR)和間隔的4個骨架區(framework region,FR)。

在T細胞發育過程中CDR1，CDR2和FR區域相對保守，CDR3區由V、D和J進行重排而形成具有功能的TCR編碼基因(T細胞克隆)，由于V(65種)、D(2種)、J(13種)基因片段本身具有多樣性，此外，由于在重排的過程中，在VD及D-J的連接區經常有非模板的核苷酸的隨機插入或刪除，進一步增加了CDR3區的多樣性(連接形成的多樣性約為2×10¹¹)。這種基因片段連接的不準確性使TCR的表達呈多樣性(即TCR庫的多樣性)，以識別各種不同的抗原。正常個體在無抗原刺激時，TCR基因重排是隨機的，因此正常人外周T細胞呈多家族、多克隆性特點。在不同抗原(腫瘤、疫苗、病院微生物或者移植物等)刺激后，TCR V區基因可對該抗原產生特異性識別，并使帶有這類基因的T細胞得到優勢擴增，可用于分析不同TCR V亞家族T細胞的表達和利用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于鼻咽癌診斷的組合標志物，該組合標志物具有靈敏度高，特異性好的優點。

本發明所采取的技術方案是：