[發明專利]一種深海芽孢桿菌及其在誘導厚殼貽貝稚貝附著中的應用

有效

• 申請號: 201810423184.0
• 申請日: 2018-05-05
• 公開（公告）號: CN108611298B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 楊金龍;梁簫;彭莉華;陳珂;魏玉利;方家松
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01K61/54;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種深海芽孢桿菌，保藏編號為：CCTCC M 2018065，分類命名：芽孢桿菌Bacillus sp.。該細菌形成的微生物被膜對厚殼貽貝稚貝的附著具有相對較高的誘導活性。還涉及一種深海芽孢桿菌在誘導厚殼貽貝稚貝附著中的應用。

技術領域

本發明涉及一株深海細菌在誘導厚殼貽貝稚貝附著方面的應用，具體涉及深海細菌芽孢桿菌(Bacillus sp.29R7-12)的分離、純化、鑒定和保藏以及其在不同初始細菌密度條件下形成的微生物被膜對厚殼貽貝稚貝附著的影響作用。

背景技術

厚殼貽貝(Mytilus coruscus)，隸屬于軟體動物門(Mollusca)，雙殼綱(Bivalvia)，貽貝目(Mytilodia)，貽貝科(Mytilidae)，是我國重要的海產貝類養殖品種，分布于黃海、渤海和東海沿岸。厚殼貽貝營養價值較高，具有開闊的養殖前景和市場開發潛力。在厚殼貽貝生活史中，浮游生活階段的后期，眼點幼蟲會附著變態成為稚貝，并最終發育為成貝。在稚貝生長為成貝的過程中，當環境發生變化，厚殼貽貝稚貝能夠自行切斷足絲，開始爬行并重新選擇適宜的附著基進行再次附著。厚殼貽貝作為一種重要的海水貝類養殖品種，其苗種主要依靠天然苗種和半人工采苗獲得。近年來，漁業資源的過度開發，天然苗種無法滿足厚殼貽貝養殖產業的發展。因此，解決種苗問題、探索利用細菌形成微生物被膜誘導厚殼貽貝附著技術等生物工程技術顯得尤為必要。

發明內容

本發明涉及的深海芽孢桿菌(Bacillus sp.29R7-12)來源于下北半島附近海域大洋沉積物(E 142.20°，N 41.18°)，海拔-1180米。利用ZoBell 2216E固體培養基分離、純化得到純種菌落，并通過16S rRNA基因測序與GENEBANK(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中核酸數據進行比對后上傳至NCBI數據庫。最終確定菌名為芽孢桿菌，獲取序列號為MG252257，該細菌保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏日期為2018年1月29日，保藏號為CCTCC M 2018065。

還涉及一種上述深海芽孢桿菌在誘導厚殼貽貝稚貝附著中的應用。

進一步地，將純種的芽孢桿菌菌株接到海水2216E液體培養基中擴大培養，離心后得到細菌沉淀，用滅菌海水洗滌并制成懸浮液，制得深海芽孢桿菌的菌液初始細菌密度為1-500×10⁶cells/ml。

該細菌形成的微生物被膜對厚殼貽貝稚貝的附著具有相對較高的誘導活性。

附圖說明

圖1為不同初始細菌密度形成的微生物被膜對厚殼貽貝稚貝附著的誘導作用

具體實施方式

下面通過對最優實施例的描述，對本發明的具體實施方式作進一步詳細的說明。

菌株的分離及保藏：

本發明涉及的深海芽孢桿菌(Bacillus sp.29R7-12)來源于下北半島附近海域大洋沉積物(E 142.20°，N 41.18°)，海拔-1180米。利用ZoBell 2216E固體培養基分離、純化得到純種菌落，并通過16S rRNA基因測序與GENEBANK(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中核酸數據進行比對后上傳至NCBI數據庫。最終確定菌名為芽孢桿菌，獲取序列號為MG252257，該細菌保藏于中國典型培養物保藏中心(CCTCC)，保藏日期為2018年1月29日，保藏號為CCTCC M 2018065。