[發明專利]利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法

在審

• 申請號: 201810419059.2
• 申請日: 2018-05-04
• 公開（公告）號: CN108732283A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發明（設計）人: 王月華;劉玉蘭;王秀華;畢小蘭;王萍;程芳園;成良玉
• 申請（專利權）人: 山東三星玉米產業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 馬俊榮

1.一種利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)儀器檢測條件的確定；

2)試劑和材料的準備；

3)樣品的前處理；

4)標線的建立；

5)三氯丙醇含量的計算；其中，步驟1)中，色譜條件為：色譜柱，HP-5MS柱：30m×0.25mm×0.25um；進樣口溫度：250℃；色譜柱升溫程序：85℃保持1min，以20℃/min速度升至165℃，保持10min，再以20℃/min的速度升至300℃，并保持8min；載氣：氦氣；不分流進樣體積：1.0uL，流量1ml/min。

2.根據權利要求1所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：步驟1)中，質譜條件為：離子源：電子轟擊模式；傳輸線溫度：300℃；離子源溫度為230℃；MS四級桿溫度150℃；溶劑延遲7min；選擇離子監測模式參數：3-MCPD的苯基硼酸衍生物147、146、196、198；3-MCPD-d5的苯基硼酸衍生物150、149、201、203。

3.根據權利要求1所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：步驟2)中，硫酸/甲醇溶液體積百分比為1.8％；碳酸氫鈉溶液和苯基硼酸溶液均為飽和溶液，硫酸鈉溶液濃度為200g/L，乙酸乙酯/乙醚混合溶液體積比為2/3，1,2-二亞油酸-3-氯丙醇酯標準品的純度≥97％，內標物1,2-月桂酸-3-氯丙醇酯-D5純度≥97％。

4.根據權利要求3所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：1,2-二亞油酸-3-氯丙醇酯標準儲備液的制備為：稱取適量1,2-二亞油酸-3-氯丙醇酯標準品，用體積比1:1的甲醇/異丙醇溶液配置成濃度為5ug/ml標準儲備液，保存于-18℃冰箱中。

5.根據權利要求3所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：內標物標準儲備液的制備為：稱取適量1,2-月桂酸-3-氯丙醇酯-D5，用體積比1:1的甲醇/異丙醇溶液配置成濃度為2ug/ml的標準儲備液，保存于-18℃冰箱中。

6.根據權利要求1所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：步驟3)中，樣品的前處理包括水解、凈化和衍生三個過程。

7.根據權利要求6所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：水解過程為：稱取100mg植物油加入玻璃管中，加入60uL內標物溶液，再加入2.0ml甲基叔丁基醚，渦旋10s，再加入1.8ml硫酸/甲醇溶液，渦旋10s至完全溶解，然后將其置于搖床上，在40±1℃溫度下反應16h，反應完后，往樣品溶液中加入0.5mL飽和碳酸氫鈉溶液，渦旋10s，以終止反應，35℃溫度下氮吹至1mL左右，以去除溶液中的有機溶劑，待凈化；凈化過程為：往待凈化液中依次加入2ml硫酸鈉溶液和2ml正己烷，渦旋10s充分混合均勻，離心，待分層后棄去正己烷，并用正己烷重復洗滌一次，然后往水相層加入1ml乙酸乙酯/乙醚混合溶液，渦旋10s充分混勻，離心，將上層溶液轉至裝有無水硫酸鎂的玻璃離心管中，重復提取三次，待衍生反應；衍生過程為：向提取液中加入200ul苯基硼酸溶液，渦旋10s，靜置5min，氮吹至全干，然后加入500ul正己烷復溶，渦旋10s至完全溶解，濾膜過濾轉移至進樣小瓶。

8.根據權利要求1所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：步驟4)中，標線的建立方法為：用100ul正己烷替代0.1g油，配置不同梯度標樣500ppb，1ppm、2ppm、4ppm和8ppm，向試管中加入60ul 3-MCPD，60ulGE，同樣品前處理過程一樣，進行水解、凈化和衍生過程；

再以3-MCPD與3-MCPD-5d的濃度比做橫坐標，以3-MCPD與3-MCPD-d5的峰面積比做縱坐標，制作線性方程。

9.根據權利要求1所述的利用氣質聯用儀檢測玉米油中三氯丙醇的方法，其特征在于：步驟5)中，三氯丙醇含量的計算按照如下公式進行：

式中：X：試樣中3-MCPD的質量分數，3-MCPD單位為mg/kg；A₁₄₇：3-MCPD衍生物對應的峰面積，m/z 147；A₁₅₀：3-MCPD-d5衍生物對應的峰面積，m/z 150；IS：加入待測樣品中的內標絕對量，μg；W：待測樣的質量，g；α：3-MCPD校準曲線的斜率。