[發明專利]miR-15a-5p在提高CAR-T細胞抗腫瘤能力中的應用

在審

• 申請號: 201810416124.6
• 申請日: 2018-05-03
• 公開（公告）號: CN108743617A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 廖興華;張子健;項園;戴周彤;黃鳳;張慧敏;李含含;李佳蓬;李慧;杜慶;張同存
• 申請（專利權）人: 武漢科技大學
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61K45/06;A61P35/00
• 代理公司: 武漢藍寶石專利代理事務所(特殊普通合伙) 42242
• 代理人: 廉海濤

本發明公開了一種miR?15a?5p在提高CAR?T細胞抗腫瘤能力中的應用，屬于生物醫學技術領域。本發明通過將Anti?CD19 CAR載體與miRNA?15a?5p抑制劑共轉T細胞，發現miRNA?15a?5p抑制劑能夠提高CAR?T細胞內的CD28的表達，使T細胞在免疫過程中快速增值、活化，提高抗腫瘤能力。因此，miRNA?15a?5p可以作為靶標用于篩選提高CAR?T細胞抗腫瘤能力的藥物，miRNA?15a?5p的抑制劑可用于制備提高CAR?T細胞抗腫瘤能力的藥物。本發明可以極大地提高CAR?T細胞的抗腫瘤能力，為抗腫瘤藥物的開發提供了新的方向。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，具體涉及一種miR-15a-5p在提高CAR-T細胞抗腫瘤能力中的應用。

背景技術

嵌合抗原受體T細胞(Chimeric Antigen Receptor T-Cell,CAR-T)是近年來新興的免疫治療技術，通過將靶細胞的特異性受體組裝到T細胞上再輸入病人體內，起到特異性腫瘤殺傷效果，取得不錯的療效。目前應用于臨床的主要是第三代CAR-T，即在T細胞表面組裝抗原受體的同時串聯一些體細胞激活所需的共刺激分子，通常包括CD28和4-1BB，使嵌合在T細胞表明的抗原受體與靶抗原結合的同時激活共刺激分子使T細胞完全活。

CD28為T細胞表面B7類分子的受體，可以在T細胞增殖和分化中起到共刺激的作用，為T細胞完全活化提供條件，還與細胞周期、表過遺傳修飾、代謝和翻譯后修飾等有關。

發明內容

本發明的目的在于提供一種miR-15a-5p在提高CAR-T細胞抗腫瘤能力中的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

本發明通過將Anti-CD19CAR載體與miRNA-15a-5p抑制劑antagomir(產品編號：miR30000068-1-10，廣州市銳博生物科技有限公司)共轉T細胞，發現miRNA-15a-5p抑制劑能夠顯著地提高T細胞內CD28的mRNA水平和蛋白質水平，以及細胞因子IFN-γ和IL-2的分泌水平，顯著增強T細胞的細胞活性和殺瘤效果。這些結果表明miRNA-15a-5p抑制劑能夠提高CAR-T細胞內的CD28的表達，使T細胞在免疫過程中快速增殖、活化，提高抗腫瘤能力。因此，miRNA-15a-5p可以作為靶標用于篩選提高CAR-T細胞抗腫瘤能力的藥物。

miRNA-15a-5p的抑制劑可用于制備提高CAR-T細胞抗腫瘤能力的藥物。

一種提高CAR-T細胞抗腫瘤能力的藥物，包含miRNA-15a-5p的抑制劑。所述的藥物還可以包含輔料，如賦形劑、載體等。

所述的miRNA-15a-5p的抑制劑包括針對miRNA-15a-5p的antagomir或siRNA，以及其他能夠抑制miRNA-15a-5p活性的化學物質。

本發明具有如下優點和有益效果：本發明可以極大地提高CAR-T細胞的抗腫瘤能力，為抗腫瘤藥物的開發提供了新的方向。

具體實施方式

以下實施例用于進一步說明本發明，但不應理解為對本發明的限制。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。

實施例1

一、Anti-CD19CAR載體的構建

CAR的元件組成包括：引導鏈(leader)、抗CD19單鏈抗體(CD19-scFv)、鉸鏈區(hinge)、CD28跨膜區(CD28TM)、CD28膜內區(CD28ICD)、4-1BB和CD3ζ鏈。各元件序列均為現有已知技術(Pub.NO.:US 2014/0271635A1)。