[發明專利]基于IgM抗體捕獲食物過敏原的ELISA試劑盒

在審

• 申請號: 201810413718.1
• 申請日: 2018-05-03
• 公開（公告）號: CN108646024A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 何韶衡;何萍
• 申請（專利權）人: 沈陽匯敏源生物科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發明提供的基于IgM抗體捕獲食物過敏原的ELISA試劑盒，屬于食品過敏原檢測領域。所述試劑盒包括以下試劑，包被有抗人IgM抗體的檢測板；洗滌緩沖液；樣品稀釋液；標準品或陽性質控品；生物素標記的食物過敏原制劑和生物素標記的抗人IgM制劑；酶標記的親和素溶液；底物顯色液；終止液。本發明選用IgM來檢測食物過敏原，并且是基于捕獲法制備的ELISA試劑盒，具有靈敏度高，重現性好的特點，并能夠一次處理大批量的樣品。實施例證明本發明提供的試劑盒檢測靈敏度達到1ng/ml。

技術領域

本發明涉及過敏原檢測試劑盒的技術領域，具體涉及基于IgM抗體捕獲食物過敏原的試劑盒。

背景技術

過敏性疾病發病率占世界總人口的30％以上，被世界衛生組織列為21世紀的四大非感染性疾病之一。近年來過敏性疾病的發病率顯著上升，成為全球關注的公眾衛生問題，郭嘉等人對過敏性疾病流行病學調查結果顯示，12億總人口中有22％的人患有過敏性疾病，例如過敏性鼻炎、哮喘、結膜炎、濕疹、食物過敏、藥物過敏和嚴重的過敏反應等，嚴重影響人們的生活質量和生命安全。

食物過敏原如蛋品，花生，牛奶，黃豆，小麥，樹木堅果，魚類和甲殼類食物，是主要食物過敏原。其中甲殼類食物中，蝦過敏原備受關注，據報道0.6％～2.8％的過敏性疾病患者對蝦過敏；人們在蝦肉中檢測出至少13種IgE結合蛋白，但原肌球蛋白被鑒定為惟一的主要過敏原，相對分子質量介于34000～39000之間；據報道，原肌球蛋白是蝦、蟹、牡蠣、烏賊等無脊椎動物的重要抗原，具有高度保守的氨基酸序列。雞蛋過敏原中，蛋白比蛋黃更易引起過敏，卵類黏蛋白為主要過敏原；其陽性率在兒童食物過敏中達35％，而成人過敏也高達12％。由于花生過敏反應的嚴重性及高發性，該過敏原引起醫療機構的廣泛關注，據報道食物誘導的過敏反應中，花生過敏占10％～47％。近年來此類疾病日益增多，成為常見病、多發病，是我國健康及經濟發展領域需要解決的重大問題。

目前，專利CN1620504A公開了用基于由特定物質的一部分基因得到的信息設計的引物進行PCR，用來測定食物中有無特定物質的方法，在檢出食物中所含的微量成分和識別有害的特定物質過敏源方面是優異的，但是該方法依賴已知檢測物的引物，但是PCR方法復雜，檢測時間長，成本高；專利CN101285840A公開了一種食物中過敏原的檢測方法，盡管該方法能夠快速簡單得到檢測結果但是該專利中并未公開相關的檢測抗體種類，同時沒有公開該方法檢測食物過敏原的檢測靈敏度和準確性。另外，以飛行質譜的分子量峰和圖譜形狀為基本參數來鑒定特征性的蛋白點。通過分析過敏原蛋白的特征對食物中過敏原進行檢測鑒定，但是需要專門的大型精密儀器，檢測成本高，分析困難需要專門的檢測人員和分析人員。

綜上所述，雖然目前研究的有關食物過敏檢測的方法很多，但都存在檢測速度慢，成本高，不適合批量檢測的問題，而且需要特定的分析儀器進行機讀，限制了食物過敏原檢測的發展。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于基于IgM抗體檢測食物過敏原的試劑盒，該試劑盒具有較強的特異性和較高的靈敏度。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了基于IgM抗體捕獲食物過敏原的ELISA試劑盒，包括以下組分：

包被有抗人IgM抗體的檢測板；

洗滌緩沖液；

樣品稀釋液；

標準品或陽性質控品；

生物素標記的食物過敏原制劑和生物素標記的抗人IgM制劑；

酶標記的親和素溶液；

底物顯色液；

終止液。

優選的，所述抗人IgM抗體的包被濃度為0.1～2000μg/ml。