[發明專利]一種LC-MS/MS測定醬油中的色胺的方法

在審

• 申請號: 201810412013.8
• 申請日: 2018-04-24
• 公開（公告）號: CN108680666A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 魏泉增;李偉民;張秀花
• 申請（專利權）人: 許昌學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種LC?MS/MS測定醬油中的色胺的方法，采用多級反應監測，以離子對161.1＝＞144.0定量，離子對161.1＝＞117定性，醬油稀釋后直接進樣分析。本發明具有操作簡單，檢測成本低等特點，線性范圍寬，回收率高的特點，具有很廣的應用范圍。

技術領域

本發明涉及一種食品成分分析領域，具體涉及一種醬油中色胺檢測方法。

背景技術

色胺是生物胺的一種，是一種高毒物質。色胺是食品在發酵在發酵過程中由色氨酸脫羧而形成。在醬油發酵過程中，有大量的色氨酸，在微生物的作用，醬油中會生成一些色胺。因此，檢測醬油中的色胺十分重要。目前常用的方法是色胺衍生化后用液相檢測，但這種方法費時較長。本發明通稀釋醬油樣品后，采用多級反應監測(MRM)分析醬油中的色胺含量。

發明內容

本發明的目的在于，克服了現有技術的前處理復雜的問題，提供了一種醬油中色胺的鑒定方法。

本發明通過以下技術方案實現：

1色譜條件，流動相A：0.1％的甲酸水溶液；流動相B：0.1％的甲酸乙腈溶液。0min，5％B；5min，20％B。

2質譜條件：采用電噴霧離子源，氣體溫度300℃，流速8L/min，毛細管電壓4000V，正離子模式。碎裂電壓65，碎裂電壓9，加速電壓4，定量離子對161.1＝＞144.0；碎裂電壓65，碎裂電壓29，加速電壓4定性離子對161.1＝＞117。

3稱取一定量色胺標準品，配制一定梯度的標準溶液，進行LC-MS/MS分析。

4.醬油樣品稀釋400-1000倍，直接進樣分析。

5.積分保留時間為3.84min峰面積，確定校正曲線。帶入樣品的保留時間為3.84min峰面積，算出濃度×稀釋倍數，即醬油中色胺含量。

附圖說明

附圖為實施例1中的擬合曲線。

具體實施方式：

下面通過具體實施例對本發明的技術方案做進一步說明：

實施例1

1色譜條件，流動相A：0.1％的甲酸水溶液；流動相B：0.1％的甲酸乙腈溶液。0min，5％B；5min，20％B，采用C3反相色譜柱。

2質譜條件：采用電噴霧離子源，氣體溫度300℃，流速8L/min，毛細管電壓4000V，正離子模式。碎裂電壓65，碰撞能量9，加速電壓4，定量離子對161.1＝＞144.0；碎裂電壓65，碰撞能量29，加速電壓4定性離子對161.1＝＞117。

3稱取一定量色胺標準品，配制27.2μg/L，136μg/L，680μg/L，3400μg/L，17000μg/L的標準溶液，進樣量為5μL，進行LC-MS/MS分析。積分保留時間為3.84min峰面積，得到校正曲線y＝853.59x+211669，R²＝0.998其中y為峰面積，x為色胺濃度。

4.醬油樣品稀釋1000倍，進樣量為5μL。

5.帶入樣品的保留時間為3.84min峰面積61319，根據校正曲線，得x為47.1μg/L，算出濃度×稀釋倍數，即醬油中色胺含量47.1mg/L。

本方法采用稀釋法，消除了氯化鈉對質譜的影響，稀釋后直接進樣避免了繁瑣的前處理。線性范圍寬20μg/L-17000μg/L，加標回收在82％-94％之間。