[發(fā)明專利]一株從木薯渣中篩選到的Lysinibacillus macroides及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810409922.6
• 申請日: 2018-05-02
• 公開（公告）號: CN108587963B
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁延芹;趙東英;汪城墻;杜秉海;姚良同;劉凱
• 申請（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/10;A01N43/38;A01P21/00;C05F11/10;C05G3/00;C05G5/00;G01N30/02;C12R1/01
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 鄭平

本發(fā)明提供一株Lysinibacillus macroides，其分類命名為Lysinibacillus Xi9。本發(fā)明的菌株產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對擬南芥具有促生效果，能夠增加擬南芥的生物量，促進(jìn)側(cè)根的增加、伸長。步驟簡單、操作方便、實(shí)用性強(qiáng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一株從木薯渣中篩選到的Lysinibacillusmacroides及其應(yīng)用，具體涉及一株能夠產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)具有促生作用的Lysinibacillusmacroides。

背景技術(shù)

揮發(fā)性物質(zhì)具有低分子量、弱極性、低沸點(diǎn)、親脂性的特點(diǎn)，與微生物的其他代謝產(chǎn)物相比，揮發(fā)性物質(zhì)(volatile organic compounds，VOCs)具有傳播距離長、低濃度即被感知、生物體間非直接接觸即可相互作用等優(yōu)勢。目前，關(guān)于植物根際促生細(xì)菌產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)的研究主要集中在引起植物系統(tǒng)抗性、抑制植物病原菌等方面，張鵬鵬等從植物根際分離得到了13株產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)對擬南芥幼苗的生長有影響的細(xì)菌，它們分屬于Enterobacter endosymbiont、蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)、嗜熱脂肪芽胞桿菌(Geobacillus stearothermophilus)、綠針假單胞菌(Pseudomonas chlororaphis)、惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida)、蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)、沙雷氏菌屬(Serratia sp.)、短小芽胞桿菌(Bacillus pumilus)、短短芽胞桿菌(Brevibacillusbrevis)、生癌腸桿菌(Enterobacter cancerogenus)和巨大芽胞桿菌(Bacillusmegaterium)。但關(guān)于細(xì)菌產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)調(diào)節(jié)植物的生長研究還較少。

Lysinibacillus macroides是芽孢桿菌的一個種，曾用名Lineola longa、Bacillus macroides。目前為止，有關(guān)Lysinibacillus macroides既能夠產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)又能夠產(chǎn)生吲哚乙酸的應(yīng)用很少。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述問題，本申請公開了一株從木薯渣中分離得到的Lysinibacillusmacroides，其產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對擬南芥幼苗具有較好的促生效果，揮發(fā)性物質(zhì)能夠使擬南芥幼苗與碳源和氮源吸收利用有關(guān)的基因表達(dá)上調(diào)。

由于菌株種屬、來源和分離方式對菌株的揮發(fā)性物質(zhì)的性能有較大影響，為了擴(kuò)大Lysinibacillus macroides的應(yīng)用領(lǐng)域、尋找“可產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)、并對擬南芥幼苗具有較好促生效果”的新菌株，本申請對不同來源的Lysinibacillus macroides產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)的性能進(jìn)行了系統(tǒng)研究，大規(guī)模實(shí)驗(yàn)摸索中偶然發(fā)現(xiàn)了一株Lysinibacillusmacroides，該菌株的揮發(fā)性物質(zhì)能夠改變擬南芥根構(gòu)型及其吸收碳、氮等營養(yǎng)成分相關(guān)基因表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)擬南芥總生物量的增加。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供一株產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)VOCs能夠促進(jìn)擬南芥幼苗生長的菌株，其分類命名為Lysinibacillus macroides Xi9，保藏編號為：CGMCC NO.15563，保藏日期為2018年04月08日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

進(jìn)一步地，所述菌株能夠分泌吲哚-3-乙酸(IAA)。

該菌是從木薯渣中分離得到，該菌株的菌落及菌體特征為：在LB固體培養(yǎng)基上37℃培養(yǎng)48h，菌落潮濕，質(zhì)地松散，圓形，奶油色，邊緣光滑，表面光滑，直徑1.0-5.0毫米。顯微鏡觀察菌體形態(tài)特征為桿狀，單細(xì)胞，革蘭氏染色為陽性，有芽孢。

該菌株的生理生化特征為：接觸酶實(shí)驗(yàn)陽性，檸檬酸鹽利用實(shí)驗(yàn)陽性，丙二酸鹽利用實(shí)驗(yàn)陽性，V-P實(shí)驗(yàn)陽性。